5月14日，美国驻以色列大使馆正式在耶路撒冷开馆。此举激化了巴以矛盾，给巴以冲突的解决制造了新障碍，也给地区紧张局势增添了更多不稳定因素。
开馆仪式上，美国总统特朗普通过视频发表致辞称，美国驻以使馆从特拉维夫迁至耶路撒冷是一件早就该做的事。他宣称，美国仍“致力于促成（以色列和巴勒斯坦之间的）持久和平协议”。美国副国务卿沙利文率领美方代表团出席开馆仪式，其中包括特朗普的女儿伊万卡和她丈夫库什纳，以及美财政部长姆努钦。据以色列媒体报道，以外交部向86个驻以外交使团发出了出席开馆仪式的邀请，但只有不到一半的使团确认参加。截至5月15日，除美国外，只有个别拉美国家已经或计划把使馆从特拉维夫迁到耶路撒冷。
5月14日，巴勒斯坦民众在加沙地带与以色列交界地区以及约旦河西岸的拉姆安拉、伯利恒、希伯伦、杰里科等城市举行抗议示威，并与以军发生冲突。根据巴卫生部公布的数字，冲突造成58名巴勒斯坦人丧生、2800多人受伤。巴勒斯坦解放组织（巴解组织）执行委员会秘书长埃雷卡特表示，巴方呼吁联合国安理会召开紧急会议，保护巴勒斯坦人民，对美国迁馆采取应对措施。巴政治分析人士指出，美国迁馆触碰了巴方的政治“红线”，巴领导层若让步，将遭到全体人民反对。巴领导层近期必须对美、以展现强硬姿态。
包括伊拉克、黎巴嫩在内的中东多国对美国迁馆表示谴责，阿拉伯国家联盟秘书长盖特同日也发表声明表示强烈反对，土耳其还决定召回其驻美、以大使。5月15日，土耳其驱逐以色列驻土大使，以色列政府随后下令驱逐土耳其驻耶路撒冷总领事。欧洲各国也对此表示担忧。法国總统马克龙谴责以色列军方对抗议美国驻以使馆迁往耶路撒冷的巴勒斯坦民众开枪的暴行。俄罗斯、德国、法国外交部均对美国迁馆决定表示了反对。
