刘红梅 吴燕倪 刘伯棠
摘 要：目的 研究番茄籽油的润肠通便作用及作用机制。方法 采用复方地芬诺酯建立小鼠便秘模型，观察番茄籽油对便秘小鼠的粪便排泄情况、小肠推进运动；采用复方地芬诺酯建立大鼠便秘模型，研究番茄籽油对便秘大鼠血清和结肠组织中NO、T-AOC水平的影响。结果 番茄籽油能够缩短便秘小鼠首次排便时间，增加便秘小鼠粪便粒数（P<0.05），改善粪便性状，增强小肠的推进运动；能降低便秘大鼠血清和结肠组织中的NO水平、增加T-AOC水平（P<0.05）。结论 番茄籽油具有较好的润肠通便作用，可能通过调控NO、T-AOC水平起到治疗便秘的作用。
关键词：番茄籽油 润肠通便 NO T-AOC
中图分类号：TS22 文献标识码：A 文章编号：1672-3791（2017）07（a）-0202-03
番茄籽是含有丰富的番茄籽油及各种活性物质，油脂含量18%～29%。番茄籽油中不饱和脂肪酸总量达到82%，亚油酸含量为55.2%，亚麻酸含量为2.2%。尤为可贵的是，番茄籽油中还含有大量的维生素E467 mg/kg、番茄红素26.3 mg/kg、β-胡萝卜素9 mg/kg和植物甾醇，其已被广泛运用于食品、保健品、药品及化妆品中。该文首次对新疆番茄籽油进行润肠通便作用进行研究，为拓宽番茄籽油的应用提供科学数据。
1 材料
1.1 实验动物
昆明种小鼠，雄性，体重18～22 g，[动物生产许可证号：SCXK（新）2003-0001]。Wister大鼠，雌雄各半，体重150～170 g，[动物生产许可证号：SCXK（新）2011-0001]。购自新疆医科大学实验动物中心。
1.2 实验药物
番茄籽油 新疆托美托番茄科技开发有限公司提供，批号：150320，直接给药。复方地酚诺酯片，成都第一制药有限公司，批号：150711。麻仁丸，湖北诺得胜制药有限公司，批号：140609，加蒸馏水溶解配制成40 mg/mL。
1.3 主要仪器和试剂
电子分析天平（沈阳龙腾），台式离心机TGL-16G（金坛市华峰仪器有限公司），电热恒温水浴锅PK-98-1（天津市泰新特仪器有限公司），紫外可见分光光度计Tu-1800型（北京普析通用仪器有限公司），-85 ℃超低温冰箱（NUARETM，日本）。总抗氧化能力（T-AOC）试剂盒，南京建成生物工程研究所，批号：20151211。一氧化氮（NO）试剂盒，南京建成生物工程研究所，批号：20160110。
墨汁：阿拉伯明胶100 g，加水800 mL煮沸至透明溶液，取活性炭50 g加至溶液中再煮沸3次，待冷却后加水定容至1 000 mL，4 ℃保存。
2 方法
2.1 番茄籽油对小鼠质量和排便时间的影响
将50只小鼠随机分为5组，即正常组、模型组、麻仁丸对照组、番茄籽油低、高剂量组，每组10只。番茄籽油低、高剂量组（20、40 mL/kg）灌胃；麻仁丸对照组组给予（20 ml/kg）；正常组和模型组每日灌胃蒸馏水。每天灌胃1次，给药体积为20 mL/kg，连续给药7 d，末次给药后禁食20 h。正常组给予等体积蒸馏水，其余各组分别灌胃给予复方地芬诺酯片（2.5 mg/kg）[1]，复制小鼠便秘模型。造模30 min后，麻仁丸对照组、番茄籽油低、高剂量组按相应剂量给予相应药物，正常组和模型组给予等体积蒸馏水。各组每只小鼠置于特制的铁丝笼中单独喂养，笼底部铺上滤纸，记录每只小鼠首次排粪便的时间、6 h内排便粒数和粪便性状。收集每次粪便，记录后更换新滤纸。
2.2 番茄籽油对便秘小鼠小肠推进作用的影响
按“2.1”项下方法分组、给药和造模，造模30 min后，各组灌胃给予墨汁（10 mL/kg），再过25 min，颈椎脱臼法处死动物，打开腹腔分离肠系膜，剪取自幽门至回盲部肠管，轻轻将小肠拉成直线，测量肠管长度作为“小肠总长度”；从幽门至墨汁前沿记为“墨汁推進长度”，通过公式[墨汁推进率=（墨汁推进长度/小肠总长度）×100%计算小肠推进百分率[2]。
2.3 番茄籽油对便秘大鼠抗氧化作用的影响
将50只Wistar大鼠随机分为5组，即正常组、模型组、麻仁丸对照组、番茄籽油低、高剂量组 ，每组10只。正常组给予等体积蒸馏水，其余各组分别灌胃给予复方地芬诺酯片（15 mg/kg·d），复制大鼠便秘模型[3]。造模14 d 后，正常组和模型组每日灌胃蒸馏水为20 mL/kg，番茄籽油低、高剂量组 （20、40 mL/kg）灌胃；麻仁丸组给予（20 mL/kg）；每天灌胃1次，连续给药30d。末次给药后禁食12 h，戊巴比妥麻醉大鼠，腹主动脉采血，分离血清。解剖大鼠分离结肠，生理盐水洗净，称取结肠0.3 g，低温下加生理盐水制备10%的结肠组织匀浆。一氧化氮（NO）测定采用硝酸还原酶法，总抗氧化能力（T-AOC）测定采用比色法，均按试剂盒说明书进行测定。
2.4 统计方法
数据以表示，各组间均数先进行方差齐性检验，用SPSS15.0软件统计分析，以P <0.05为差异有统计学意义。
3 结果
3.1 番茄籽油对便秘小鼠体质量和排便的影响
小鼠平均体重，各组相比并未出现显著增长。与正常组相比，模型组首粒粪便排出时间延长和6 h 内排便粒数减少，有显著性差异（均为P <0.05），表明便秘模型小鼠成功建立。与模型组相比，各给药组小鼠排便时间缩短，6 h 内排便粒数增加（P <0.05）。与麻仁丸对照组相比，番茄籽油大、小剂量组首便时间有差异（P <0.05）；番茄籽油大剂量组排便粒数有差异（P <0.05）。番茄籽油两个剂量组之间相比首便时间有差异（P <0.05） ，排便粒数差异无统计学意义（P >0.05），结果见表1。
3.2 番茄籽油对便秘小鼠小肠推进运动的影响
与正常组相比，模型组小鼠小肠墨汁推进率减少，有显著性差异（P <0.05），表明造模成功。與模型组相比，各给药组小鼠小肠墨汁推进率增加，趋向正常组（P <0.05）。与麻仁丸对照组相比，番茄籽油大计量组肠墨汁推进率均增加，有差异（P <0.05）。番茄籽油两个剂量组之间相比小肠墨汁推进率增加差异无统计学意义（P >0.05），结果见表2。
3.3 番茄籽油对便秘大鼠血清和结肠组织中NO、T-AOC的影响
与正常组相比，模型组大鼠血清及结肠组织中NO含量，T-AOC活性有显著性差异（P <0.05），表明造模成功。与模型组相比，各给药组大鼠血清及结肠组织中NO含量降低，T-AOC活性增加（P <0.05）。与麻仁丸对照组相比，番茄籽油小剂量组大鼠血清中T-AOC活性增加有差异（P <0.05）；番茄籽油大剂量组大鼠血清及结肠组织中NO含量降低有差异（P <0.05），血清和结肠组织中T-AOC活性增加有差异（P <0.05）。番茄籽油两个剂量组之间相比，大剂量组血清和结肠组织中T-AOC活性增加有差异（P <0.05），结果见表3。
4 讨论
该研究中，小鼠灌胃不同剂量的番茄籽油7 d后，小鼠未见稀水便，体质量未见明显增加，可见番茄籽油对肠道的作用是比较温和的。与模型组相比，高低两个剂量组的小鼠排黑便的时间缩短，6 h的排便粒数显著增加，小肠墨汁推进率显著增加。因此，可以认为番茄籽油对便秘模型小鼠具有润肠通便作用。
便秘是临床常见的一种慢性消化道症状，主要表现为粪便干结、质硬、排便量减少、排便费力或排便次数减少等。由于硬便的长期滞留和刺激，肠道黏膜会有不同程度的炎性改变，从而引起一系列的自由基或脂质过氧化反应[4-5]。NO是一种由血管内皮细胞释放的新型信号分子，广泛参与机体生理病理机能的调节。过高的NO水平会使肠管平滑肌松弛，大肠传导减慢，从而引起肠道运动的异常，引起便秘[6]。同时NO在生成时产生了大量的氧自由基[7]。
番茄籽油含有大量的亚油酸、维生素、番茄红素、β-胡萝卜素，这些都是天然的抗氧化剂，体外具有清除自由基和抗氧化活性[8-9]。该研究通过使用番茄籽油对便秘模型大鼠进行干预，发现番茄籽油高低剂量组均能不同程度降低血清和结肠组织中NO水平，增加T-AOC水平，说明番茄籽油可以通过调节NO在大鼠体内的浓度从而恢复大肠生理机能和传导功能，减轻自由基的损害，提高肠道的抗氧化能力，进而改善通便功能。
参考文献
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