如果你是说原核表达上清蛋白是分泌到培养基的话，那需要你构建分泌蛋白的信号肽，使你的目的蛋白可以分泌出来，不过原核分泌蛋白比较难以分泌到培养基中，一般都是胞内表达，通过破碎细胞的方式获得可溶性蛋白（在细胞的破碎上清液中），通过理性的方式获取可溶性蛋白上清液，之后再纯化就行.
一般原核表达本身的局限性就是包涵体表达。
虽然能短时间获得大量蛋白，但是由于本身折叠不正确，无法糖基化修饰，造成包涵体表达。
如何得到上清蛋白呢？一般认为有以下几种方法。
1.改变诱导条件，如降低温度，如28或16度，相应地增加诱导时间。
降低IPTG的浓度，也可以增加上清的可能性。
2.使用利于二硫键形成的表达菌株也可以促进可溶性表达。
3.使用一些促溶标签表达载体，也可以促进可溶性表达。
4.优化序列，尽量避免糖基化修饰等一系列不利于原核表达。
这样可溶性的蛋白可能性就会大大提高。
基本都是这些操作，实在不行就真核表达。
望采纳。
