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PCR引物设计

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PCR引物设计

RT-PCR的引物如何设计?pcr引物设计的基本原则有哪些设计PCR引物应遵循哪些原则?如何进行pcr引物设计

原理:PCR引物设计的目的是为了找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板DNA序列,引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否。

原则:引物应用核酸系列保守区内设计并具有特异性。

产物不能形成二级结构。

引物长度一般在15到30碱基之间。

G加C含量在百分之40到60之间。

碱基要随机分布。

引物自身不能有连续4个碱基的互补。

引物之间不能有连续4个碱基的互补。

引物5撇端可以修饰。

引物3撇端不可修饰。

引物3撇端要避开密码子的第3位。

PCR的引物怎样设计,过程是怎样的?寻求详细答案。谢谢!
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