栏目分类:
子分类:
返回
名师互学网用户登录
快速导航关闭
当前搜索
当前分类
子分类
实用工具
热门搜索
名师互学网 > 百科 > 学习

细胞转染

学习 更新时间: 发布时间: 百科归档 最新发布 模块sitemap 名妆网 法律咨询 聚返吧 英语巴士网 伯小乐 网商动力

细胞转染

如何做好细胞转染实验?

1.首先要准备所需的材料①转染的核酸,如siRNA,miRNA,mimic、inhibitor,也可以转染DNA。

②转染试剂和动物。

③进行注射的器材。

2.试剂的使用量3.注射途径等,做之前多看一些文献。

(转自英格恩生物公众号)

1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。

为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。

注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。

2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。

由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮肤,头发,所有徒手接触过的物品或暴露在空气中的物品等,因此保证实验中的每个环节不受RNA酶污染非常重要。

3.健康的细胞培养物和严格的操作确保转染的重复性 通常,健康的细胞转染效率较高。

此外,较低的传代数能确保每次实验所用细胞的稳定性。

为了优化实验,推荐用50代以下的转染细胞,否则细胞转染效率会随时间明显下降。

4.选择合适的转染试剂 针对siRNA制备方法以及靶细胞类型的不同,选择好的转染试剂和优化的操作对siRNA实验的成功至关重要。

如Entranster-R4000,专门针对siRNA等RNA转染。

转载请注明:文章转载自 www.mshxw.com
本文地址:https://www.mshxw.com/ask/591085.html
我们一直用心在做
关于我们 文章归档 网站地图 联系我们

版权所有 (c)2021-2022 MSHXW.COM

ICP备案号:晋ICP备2021003244-6号