免疫组织化学和激光共聚焦扫描显微镜冰冻组织冰冻切片（10米厚）被放置在明胶涂层幻灯片和培养15分钟。100甘氨酸和0.1%羧基牛血清白蛋白（奥利昂，瓦赫宁根大学，荷兰）型，PH值7.4。然后冰冻切片孵育过夜的主要对波形蛋白抗体（克隆模式；西格玛，圣路易斯，钼，美国）在潮湿室。灰化后在公共电视网，准备培养生物驴抗抗体其次是streptavidin-cy-2（biotrend，科隆，德国）。细胞核染色与0.002%7-aminoactinomycin丁（分子探针，卡尔斯巴德，加利福尼亚州，美国）。遗漏的主要抗体作为阴性对照。该immunolabelled切片检查与tcn-nt徕卡激光显微镜，配备氩氪和氦氖激光。系列共聚焦部分采取了通过深入的组织样本在0.5 -米间隔。为了提高图像质量和获得高信噪比每个图像从一系列信号平均。经过数据采集，图像被转移到一个硅谷图形工作站印或辛烷值（硅谷图形公司，桑尼维尔，加利福尼亚州，美国）的图像恢复和重建使用imaris，多通道图像处理软件（平面，与ü丰富，瑞士）。该方法的原理和许多图像获得这一技术已先前公布的[ 46，47 ]。在标记的实验中，冰冻切片孵育过夜的原发性多克隆抗体（抗c - kit，丹麦，丹麦）驴抗兔抗体之后，加上接触件（dianova，汉堡，德国）。经过反复冲洗，硫化铅，准备孵育antivimentin抗体直接耦合与Cy 3。肌原纤维染色的F -肌动蛋白与灼633-conjugated鬼笔环肽。细胞核染色与4,6-diamidino-2-phenylindole（吲哚）（分子探针）。所有的准备工作都安装在mowiol（赫斯特，法兰克福，德国）。经典的免疫细胞化学进行fomalin-fixed，石蜡切片中的卵白素一生物素过氧化物酶复合物的方法，如以前所报告[ 10]。主要是：CD 34单克隆抗体用于–：100，1，10（biogenex克隆qbend，圣拉蒙，加利福尼亚州，美国）和波形蛋白，单克隆，1 :100，克隆v-9（biogenex）。
