pamps:你好，关于植物免疫的ETI能详细说一下吗？谢谢

1.你好，关于植物免疫的ETI能详细说一下吗？谢谢

植物通过感知来识别“非我”分子，通常采用两套策略来启动防卫反应抵抗外来微生物入侵者。第一套策略是基于胞外跨膜受体（PRRs）识别微生物相关的保守分子（PAMPs）激活寄主防御系统，产生胼胝质沉积（葡聚糖高分子）加强植物细胞壁来阻止病原入侵，阻止大多数微生物的定植，这个过程被称为病原物相关分子模式触发免疫（PAMP-triggered immunity，PTI）。目前已证明PTI在植物抗病免疫系统发挥着十分重要的作用。尽管植物 PTI 成功抵挡了大部分病原微生物，然而少数病原微生物则进化出相应的对策来突破PTI防线：向寄主植物细胞注入毒性因子（Virulence Factors）或者叫效应子（Effector Molecules）来抑制植物的PTI。病原效应子在成功清除感染道路障碍（PTI）后，一些效应子在植物体内造成扰动，被定位在植物细胞内的抗性（R）蛋白所感知，从而启动了植物抵抗外来微生物入侵的第二套策略：效应子触发免疫（Effector-Triggered Immunity，ETI）。R蛋白是一类植物与病原微生物共同进化形成的高度敏感的免疫受体，是R 基因编码的产物。这种由R基因介导的抗性通常称为“基因对基因”的抗病性，与传统的植物垂直抗性（Horizontal Disease　Resistance）概念相对应。植物通过识别病原菌效应子蛋白，激发一系列的抗病防卫反应，如受感染的细胞程序性细胞死亡和生产抗菌分子（如水解酶，几丁质酶和β - 1,3 - 葡聚糖酶）等。如果防卫反应非常强烈，会在侵染点形成过敏性反应（HypersensitiveReaction，HR），导致局部抗性，限制病原菌的生长、繁殖和扩张，这种现象又叫植物系统获得性抗性（SAR）。

2.为什么要将PAMPS水凝胶浸泡在氢氧化钠溶液中啊

它们都易溶于碱性水溶液中，不光是氢氧化钠，氢氧化钾、氢氧化钙和碳酸钠水溶液都可以浸胶，PAMPS中属于有机磺酸高聚物，它在酸性溶液中会大幅度增加黏度导致不能使用。

3.请教阳离子聚丙烯酰胺离子度的检测方法

现在还没有阳离子聚丙烯酰胺的标准，只能检测阳离子读。阳离子度的测定如下：阳离子度的测定采用胶体滴定法，用称量纸称取干燥恒重后的阳离子聚丙烯酰胺(准确至0.0001g)于250mL称量瓶中，加入T.B.指示剂，用已配制好的PAMPSNa标准溶液滴定。当溶液颜色由蓝色变为赤紫色时即为滴定终点。取其平均值为PAMPSNa的消耗体积，所消耗PAMPSNa的体积记为Vo。

4.pyroptosis是什么？

通常采用两套策略来启动防卫反应抵抗外来微生物入侵者。第一套策略是基于胞外跨膜受体（PRRs）识别微生物相关的保守分子（PAMPs）激活寄主防御系统，产生胼胝质沉积（葡聚糖高分子）加强植物细胞壁来阻止病原入侵，阻止大多数微生物的定植，这个过程被称为病原物相关分子模式触发免疫（PAMP-triggered immunity，目前已证明PTI在植物抗病免疫系统发挥着十分重要的作用。尽管植物 PTI 成功抵挡了大部分病原微生物，然而少数病原微生物则进化出相应的对策来突破PTI防线：向寄主植物细胞注入毒性因子（Virulence Factors）或者叫效应子（Effector Molecules）来抑制植物的PTI。病原效应子在成功清除感染道路障碍（PTI）后，一些效应子在植物体内造成扰动，被定位在植物细胞内的抗性（R）蛋白所感知，从而启动了植物抵抗外来微生物入侵的第二套策略：效应子触发免疫（Effector-Triggered Immunity。

5.β-葡聚糖的作用机制

葡聚糖和EGTA购自Sigma公司；其余试剂均为进口分装或国产分析纯。1.2 细胞培养小鼠巨噬细胞RAW264.7购自中国科学院上海生命科学研究院。细胞生长汇合成单层细胞时及时传代,常规培养液为含10%胎牛血清的RPMI1640。1.3 细胞生长曲线和蛋白质含量的测定取对数生长期的细胞按3×103 个/孔接种于96孔板(Cellstar),待细胞贴壁后，吸出孔内的培养液和未贴壁的细胞。葡聚糖的培养液200 μl，每个β-葡聚糖浓度作3个平行孔。于倒置相差显微镜下观察细胞生长情况,然后将其中1块板以中性红比色法检测细胞生长情况,另1板用lowry法测定蛋白质含量。中性红比色法测得的D值和蛋白质含量为纵坐标,分别绘制细胞生长曲线和蛋白质变化曲线。1.4 胞内游离钙浓度测定细胞内游离钙浓度的测定按文献方法进行。1.5 cAMP浓度测定于100 ml培养瓶内接种RAW264.7细胞,待细胞生长接近汇合时给予不同浓度β?葡聚糖刺激,取样时弃培养液,用橡皮刮收集细胞,冰浴下超声破碎细胞,去除沉淀的高氯酸钾,取上清液冷冻干燥后于-20℃保存备用。cAMP浓度测定按试剂盒(上海中医药大学)说明书进行。2.1 β-葡聚糖对RAW264.7细胞生长的影响在相差显微镜下观察,β-葡聚糖对RAW264.7细胞形态无明显影响。对生长曲线和培养液内蛋白质含量的作用均呈双相性。低浓度β-葡聚糖对RAW264.7细胞具有促进作用,随着β-葡聚糖浓度的逐渐增大,D值也不断升高,至β-葡聚糖浓度100 μg/ml时达最高峰,与对照组(不加β-葡聚糖)比较差异有统计学意义(P<但β-葡聚糖浓度进一步增高,当浓度为400 μg/ml时几乎完全抑制细胞增殖。2.2 β-葡聚糖对RAW264.7细胞游离钙的影响加入β-葡聚糖刺激后胞内游离钙迅速上升,游离钙上升幅度与β-葡聚糖浓度有关。以EGTA螯合培养环境中钙离子的结果显示，细胞外钙离子存在与否对β-葡聚糖刺激引起的细胞游离钙波动有明显影响。提示升高的游离钙来自细胞外Ca2+的内流。2.3 β-葡聚糖对RAW264.7细胞内cAMP含量的影响β-葡聚糖刺激1 min时细胞内cAMP明显增高(P<刺激后5～10 min 则cAMP含量开始下降,巨噬细胞是机体免疫系统专职吞噬细胞之一,源自血液单核细胞,成为机体抗入侵微生物的第一道防线,在机体抗真菌感染中也起着重要作用。它通过免疫球蛋白受体和补体受体识别并吞噬受调理素作用的微生物;对于未经调理作用的微生物,则通过一组胚系编码的蛋白-模式识别受体(PRRs)迅速识别表达于微生物表面的称作病原相关微生物模式（PAMPs)的保守微生物分子,如主要存在于革兰阴性菌的脂多糖、革兰阳性菌的磷脂酸以及真菌的葡聚糖等。β-葡聚糖是真菌细胞壁含量最高的多糖,葡聚糖可促进多种细胞活化。我们注意到微量β-葡聚糖虽可促进RAW264.7细胞增生,但对细胞结构形态无明显作用。通过对细胞内第二信使传递系统的观察发现,每100 g绣球菌含有β-葡聚糖高达43.6g，绣球菌所含的β-葡聚糖为菇类之最，绣球菌主要分布在国内的吉林省安图、抚松、敦化、靖宇、长白等林区。但是资源蕴藏量比较稀少，还可利用菌丝体进行深层发酵培养。其培养物对小白鼠肉瘤180有抵抗作用。另外产生对某些真菌有抵抗作用的绣球菌素(sparassol)。青稞β-葡聚糖是青稞籽粒胚乳细胞壁的主要成分。占细胞壁干重的75%左右，具有降血脂、降胆固醇、调节血糖、提高免疫力、抗肿瘤和预防心血管疾病的作用，引起了全世界的关注，青稞是藏族群众的基本口粮和西藏最大的特殊作物。总产稳定在62-63万吨，扣除基本的生活生产需求55万吨，农牧民人均积压青稞达30公斤左右，加工滞后，转化增值困难，富粮穷户比较普遍，2001-2004年全区农牧民人均收入仅1404-1861元。政府积极推动的安居工程。子女教育及家庭非自产生活生产消费等都要靠国家补贴，生活水平和质量改善极慢，加快农业产业化发展，实现农产品转化增值，进而增加农民收入成为农业生产的基本目标，2 人类富贵病上升引起国内外对西藏青稞高β-葡聚糖含量优势的特别青睐,随着人类生活水平的提高，青少年肥胖症普遍增加1-2倍，引致各类慢性病发病率提高50%以上，脑血管疾病成为人类死亡率最高的第一大疾病，我国高血压发病率达到18.8%。血脂异常人群超过2亿，诊断糖尿病患者达到4000多万人，动物类食品比重提高：肉类摄入过多，营养过剩特别是胆固醇，糖分等摄入积累过量，果蔬摄入量低，铁质严重不足，是导致上述疾病高发的关键因素，高蛋白。高纤维，高维生素，高矿物和低脂肪，低胆固醇，低糖，食品概念也就应该应运而生了”富含β-葡聚糖等膳食纤维成分的燕麦，大麦及其青稞食品受到特别青睐。

6.中国科学家用疟原虫治疗癌症真的可行吗？

也是人类和动物体内最常见的寄生虫。疟原虫感染治疗癌症并不是突然出现的，疟原虫感染治愈晚期癌症的临床实验也是必须建立在许多理论研究成果之上，之前已经有多项研究显示疟原虫感染可能具备抗肿瘤效果。通过诱导小鼠Lewis肺癌模型的先天免疫和适应性免疫，疟原虫感染具有抗肿瘤作用。疟原虫具有糖基磷脂酰肌醇（GPI）锚定、基因组DNA、疟原虫素等组成的病原体相关分子模式（PAMPs），可被先天免疫系统迅速识别。在疟原虫感染后可以激活巨噬细胞，自然杀伤（NK）细胞，γδT细胞、自然杀伤T细胞（NKT）,推测疟原虫感染引起的宿主免疫可增强抗肿瘤免疫。恶性疟原虫感染红细胞后产生疟原虫蛋白VAR2CSA，该蛋白与一种特异性表达于胎盘的硫酸软骨素（CS）结合。而同样的CS修饰存在于恶性细胞上，并且它可以被重组VAR2CSA （rVAR2）特异性靶向。rVAR2蛋白在体内可特异性定位于肿瘤细胞，通过与该蛋白结合的细胞毒性化合物如白喉毒素，可以在体内特异性靶向抑制肿瘤细胞的生长和转移。2017年陈小平团队在oncotarget发表研究结果显示表达小鼠glypican-3 (GPC3)蛋白（P.y-GPC3）的疟原虫株可显著抑制肝癌移植后的肿瘤生长，延长荷瘤小鼠的生存期。

7.葡聚糖有多少种

β-葡聚糖百科名片β-葡聚糖是用独特的工艺开发的一种新的产品，其来源于新鲜的食品啤酒酵母。其中前者具有抗肿瘤性质，而且能够极大地提高人体自然免疫力。目录简介特点性状用途测定方法技术指标应用领域展开简介特点性状用途测定方法技术指标应用领域展开编辑本段简介Glucan(Glucosan)，为D-葡萄糖单体借由糖苷键的键结所形成的多糖。由于D-葡萄糖残基彼此间结合样式的不同而分为多种，广泛分布于微生物、植物、动物界。其中异碳头糖苷键是以β方式连接的为β-葡聚糖，如褐藻类的海带多糖（laminarin，主要以β-1，高等植物的纤维素、（β-1，编辑本段特点1. 优良免疫激活剂2. 强大的自由基清除剂3. 激活巨噬细胞、噬中性细胞等清除由辐射造成细胞分解碎片4. 能够使巨噬细胞辨别和破坏变异细胞5. 协助受损组织如淋巴组织细胞加速恢复产生细胞素（IL-1）6. 促使包括抗生素，抗寄生药在内的其他药物更好地发挥效用7. 减低血液中的低密度脂肪，提高高密度脂肪，减少高血脂的发生编辑本段性状无色或略黄色粘稠溶液、略特性的的气味编辑本段用途1．健康食品营养补充2．胶囊类3．功能饮料、口服液等4．医药及化妆品配料5．其他抗衰老、抗辐射等功能性食品编辑本段测定方法β-葡聚糖含量的测定方法，（1）粘度法：其原理是大麦抽提液的粘度主要由β-葡聚糖产生(Burnett，因为不同来源的β-葡聚糖的分子量不同；而在葡聚糖含量相同时，分子量较大者产生的粘度较大，这样β-葡聚糖粘性的大小并不完全取决于其含量，也取决于分子量大小(Sanlinier等，抽提条件对其粘度有明显的影响。其原理是利用特定的盐或有机溶剂沉淀抽提液中的β-葡聚糖(Wood，该方法的局限性在于抽提不能完全排除其它物质的干扰。在高温下抽提时，抽提液中含有其它成分如淀粉等，因而干扰测定的结果。（3）酶法：Anderson等(1978)采用特定的β-葡聚糖内切酶得到寡糖，经酸解后采用葡萄糖氧化酶/过氧化酶试剂测定葡萄糖的含量。此法后经Henry等(1988)修改为测定还原糖的含量，但因测定更为迅速而实用性明显提高。Martin等(1981)和郑祥建等(1995)用纤维素酶测定谷物中β-葡聚糖的含量。这主要根据纤维酶不能分解微晶纤维素，而谷物中的纤维素多为微晶状，因而不至于干扰β-葡聚糖的测定结果。由于酶法不需要抽提，选用的酶为特定的，（4）荧光法：主要是利用荧光物质(Calcoflour)可与β-葡聚糖特异性结合，而与其它多糖如纤维素、戊聚糖的亲和力很弱这一特性进行测定。Wood等(1984)利用此法测定了燕麦的β-葡聚糖含量。Sendry等(1989)则利用改进的Calcoflour-FIA法测定了啤酒和麦芽汁的β-葡聚糖含量。可进行大批量的样品测定，根据刚果红与β-葡聚糖结合具有高度专一性，将刚果红加入样品溶液中，在一定温度下准确反应一定时间后，测定其吸光度，根据β-葡聚糖标准曲线可知样品中β-葡聚糖的含量。g编辑本段应用领域β-葡聚糖的活性结构是由葡萄糖单位组成的多聚糖，它能够活化巨噬细胞、嗜中性白血球等。能锁定休眠期、耐药性及亚临床病灶的“残存病毒细胞”减毒增效;极大限度的保障临床治疗效果，酵母葡聚糖可以快速激活机体自身的免疫监管和识别机制，使自身免疫系统达到最佳平衡状态，从而在最短时间内迅速提高人体抗病能力，2.酵母葡聚糖—-与灵芝媲美的健康食品酵母葡聚糖这种特殊的超微螺旋型分子结构能是免疫活性最强且最易被人体吸收的形式。当酵母葡聚糖进入人体后。其螺旋结构决定其不会在胃肠道内被水解成葡萄糖等单糖（对糖尿病人无影响），而是与特异性受体相结合，通过胞吞作用（或胞饮作用），最终穿过肠上皮而进入淋巴系统，并从淋巴系统进入血液系统而发挥作用，其有效成分灵芝多糖，大部分都是葡聚糖，但由于灵芝富含纤维、不容易食用。而且灵芝有着坚实的细胞壁，很难被人体吸收，酵母中提取的葡聚糖具有95%以上的肿瘤抑制率，是生物活性最强的葡聚糖，因此可以说酵母葡聚糖是不折不扣的，天添酵母·天然安全 天添酵母葡聚糖主要成分为来自天然酵母细胞壁的β-1”3-葡聚糖和各种维生素。酵母中提取的葡聚糖生物活性最强。它具有95%以上的肿瘤抑制率，·中老年人、体质虚弱者、病人特别是重症患者（放、化疗患者）。·其它亟需调节免疫力者；β-葡聚糖是白色念珠菌细胞壁含量最高的多糖；根据β-葡聚糖溶解性可以分为不溶性和可溶性β-葡聚糖。其中可溶性β-葡聚糖包括碱溶性和酸溶性的葡聚糖。根据糖链结构差异可分β-(1→3)-葡聚糖和β-(l→6)-葡聚糖，甲基化作用和CNMR分析研究证明。酸溶性葡聚糖来源于酵母。菌丝体和菌丝形成细胞，是一种高度分支的1→4链连接的聚合物，酵母细胞和菌丝细胞壁中的不溶性葡聚糖由30%~40%的β-（1→3）-葡聚糖和43%~53%的β-（1→6）-葡聚糖的混合物组成，通过急性毒性试验发现。白色念珠菌β-葡聚糖对小鼠各脏器除肝脏以外。未见明显的毒性作用，而且急性毒性试验表明，不溶性β-葡聚糖的安全范围大于可溶性β-葡聚糖，值得进一步研究其药效学作用，编辑本段作用机制材料与方法1.1 试 剂RPMI1640、胎牛血清购自Gibco公司，葡聚糖和EGTA购自Sigma公司；其余试剂均为进口分装或国产分析纯?1.2 细胞培养小鼠巨噬细胞RAW264.7购自中国科学院上海生命科学研究院；每3天更换1次培养液，细胞生长汇合成单层细胞时及时传代,常规培养液为含10%胎牛血清的RPMI1640,1.3 细胞生长曲线和蛋白质含量的测定取对数生长期的细胞按3×103 个/,待细胞贴壁后,吸出孔内的培养液和未贴壁的细胞。葡聚糖的培养液200 μl;每个β-葡聚糖浓度作3个平行孔。每天定时取上述培养板2块,于倒置相差显微镜下观察细胞生长情况。然后将其中1块板以中性红比色法检测细胞生长情况,另1板用lowry法测定蛋白质含量,中性红比色法测得的D值和蛋白质含量为纵坐标。分别绘制细胞生长曲线和蛋白质变化曲线,1.4 胞内游离钙浓度测定细胞内游离钙浓度的测定按文献方法进行,但β-葡聚糖浓度进一步增高,D值反而下降,ml时几乎完全抑制细胞增殖。2.2 β-葡聚糖对RAW264.7细胞游离钙的影响加入β-葡聚糖刺激后胞内游离钙迅速上升,游离钙上升幅度与β-葡聚糖浓度有关。以EGTA螯合培养环境中钙离子的结果显示，细胞外钙离子存在与否对β-葡聚糖刺激引起的细胞游离钙波动有明显影响。提示升高的游离钙来自细胞外Ca2+的内流。2.3 β-葡聚糖对RAW264.7细胞内cAMP含量的影响β-葡聚糖刺激1 min时细胞内cAMP明显增高(P<刺激后5～10 min 则cAMP含量开始下降,但仍较基础水平高。讨 论巨噬细胞是机体免疫系统专职吞噬细胞之一,源自血液单核细胞,广泛分布于所有组织中,成为机体抗入侵微生物的第一道防线,在机体抗真菌感染中也起着重要作用。它通过免疫球蛋白受体和补体受体识别并吞噬受调理素作用的微生物;对于未经调理作用的微生物,则通过一组胚系编码的蛋白-模式识别受体(PRRs)迅速识别表达于微生物表面的称作病原相关微生物模式（PAMPs)的保守微生物分子,如主要存在于革兰阴性菌的脂多糖、革兰阳性菌的磷脂酸以及真菌的葡聚糖等。β-葡聚糖是真菌细胞壁含量最高的多糖,具有广泛的生物学效用。葡聚糖可促进多种细胞活化。我们注意到微量β-葡聚糖虽可促进RAW264.7细胞增生,但对细胞结构形态无明显作用。通过对细胞内第二信使传递系统的观察发现,β-葡聚糖可明显增加细胞内游离钙和cAMP。胞内游离钙和cAMP是细胞内重要的信使分子,介导许多重要的生理功能。通过观察细胞游离钙和cAMP的变化,可以了解β-葡聚糖信号在靶细胞内的传导机制。β-葡聚糖刺激可在2～5 min内使细胞内游离钙迅速升高,而且在一定范围内其上升幅度与β-葡聚糖剂量相关。细胞外Ca2+存在与否对β-葡聚糖刺激后胞内游离钙波动有明显影响,提示胞内游离钙的升高主要来源于细胞外Ca2+的内流而非细胞内钙库的动员。β-葡聚糖使细胞内cAMP浓度升高是否与β-葡聚糖促细胞增生作用有关,cAMP含量变化与细胞蛋白合成的量相关。[3]β-葡聚糖含量最高的植物青稞β-葡聚糖是青稞籽粒胚乳细胞壁的主要成分，占细胞壁干重的75%左右。具有降血脂、降胆固醇、调节血糖、提高免疫力、抗肿瘤和预防心血管疾病的作用，青稞是藏族群众的基本口粮和西藏最大的特殊作物，扣除基本的生活生产需求55万吨，农牧民人均积压青稞达30公斤左右。转化增值困难，子女教育及家庭非自产生活生产消费等都要靠国家补贴，生活水平和质量改善极慢。实现农产品转化增值，进而增加农民收入成为农业生产的基本目标。2 人类富贵病上升引起国内外对西藏青稞高β-葡聚糖含量优势的特别青睐。随着人类生活水平的提高，青少年肥胖症普遍增加1-2倍，引致各类慢性病发病率提高50%以上。青稞加工提供技术支撑，对促进该区域农产品的发展给以帮助支持。