孔秀红
【摘 要】目的：探讨冷凝集素对血型鉴定和交叉配血的干扰影响及处理方法。方法：回顾性分析2018年3月-2019年5月收治的23例冷凝集素增多症患者的临床资料，对其标本，进行了盐水法，改良凝聚胺法，微柱凝胶免疫法，以及经典抗人球蛋白试验等鉴定特异性抗体。结果：在不同温度下凝集程度有差别，其中4℃时有明显凝集，而在37℃时凝集逐渐消失。结论：对于存在冷凝集的患者，在进行交叉配血时，应采用加温输注，以清除患者血清中冷凝集素的影响。
【关键词】冷凝集素;血型鉴定;交叉配血;干扰;对策
【中图分类号】R445【文献标识码】A【文章编号】1672-3783（2020）03-09--02
交叉配血在临床输血治疗中起着至关重要的作用，而准确的血型结果又是进行交叉配血的前提。输血科在日常工作中经常会遇到各种原因导致的血型鉴定困难和疑难配血的情况。其中，冷凝集是引起这种困难的最常见因素[1]。低温或者一些病理情况下，冷凝集素的非特异性凝集会干扰实验结果。本研究回顾性分析23例冷凝集素增多症患者的临床资料，总结原因，提出处理方法。现报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选取2018年3月-2019年5月收治的23例冷凝集素增多症患者为研究对象。纳入标准：患者血红蛋白（Hb）<60g/L;无传染性疾病。排除标准：血型为Rh（﹣），肝功能严重受损，有自身免疫性疾病的患者。23例患者中男12例，女11例，年龄50-86岁，平均年龄（76.32±5.21）岁。
1.2 方法
1.2.1 血型及血清学检测 ①試剂：抗A抗B血型定性试剂，人ABO血型反定型红细胞试剂，RhD血型定型试剂，改良凝聚胺试剂。②检测方法：ABO血型鉴定，Rh血型鉴定。③冷凝集抗体滴度测定：取患者不抗凝静脉血2mL，放置在37℃孵育，待血液凝固后分离血清，患者抗凝血2mL，用温生理盐水洗涤RBC 3次配成3%-5%的细胞悬液;取10支试管，依次编号1-10，每管中加生理盐水0.2mL，并在第1管中加血清0.2mL，然后倍比稀释至第9管，混匀后弃去0.2mL，将第10管作为空白对照;每管中加入3%-5%的红细胞悬液0.2mL，混匀后置4℃冰箱中12h后观察结果。记录有明显凝集的最后1管的滴度，若第9管仍有凝集，则继续往下稀释观察其最高滴度。滴度>1︰32有诊断意义[2]。
1.2.2 交叉配血试验 将患者标本与B型献血者在室温进行凝聚胺及盐水法交叉配血，操作规程严格按照说明书上进行，主侧出现明显凝集，次侧出现小颗粒状弱凝集，交叉配血不合;故将交叉试验所需的凝聚胺及盐水放置37℃水浴箱预热，用温盐水将患者的红细胞洗涤3次配置成2%-5%的红细胞悬液，进行交叉配血。在37℃的环境中进行结果判读，取出试管轻轻混合读取结果，在镜下观察时也需将玻片预热之后再判读结果。
1.3 观察测评指标 凝集素的效价要保证在一个正常值范围内，冷凝集素的效价过高，冷凝集素对血型测定和交叉配血会产生一定的干扰现象，使各种血型出现混乱。通常情况下，利用未加处理的红细胞和血清测定凝集，并通过凝集判定冷凝集素的效价，作为鉴别冷凝集素特异性的指标。
2 结果
查询患者临床资料发现其以往住院和输血时均为A型Rh（D）阳性，并根据以上试验结果分析为自身冷凝集素或37℃不反应的无临床意义同种抗体影响血型鉴定，对该患者血样采用抗人球蛋白卡式法进行交叉配血，取A型Rh（D）阳性献血员配血，主次侧均无凝集反应、无溶血，配血相合。根据上述结果选择交叉配血相合的A型Rh（D）阳性悬浮红细胞2U发给临床。临床输注时血液制品使用输血加温器，37℃预热待输血液，使其恢复到人体正常温度或接近正常温度后进行缓慢匀速输注。患者输注后无不良反应发生，Hb由41.2g/L上升到59.2g/L，贫血症状得到改善。
3 讨论
冷凝集素是一种大分子针对RBC膜抗原的免疫球蛋白–M（immunoglobulin–M，Ig-M）型抗体，其具有可逆性，在4℃时抗体活性最强，可与自身红细胞和他人红细胞发生凝集反应，当温度升高后活性减弱，凝集消失。正常人体内含量极低且效价较低，一般效价在1∶16以下，不会对红细胞产生影响。但在某些疾病下，如自身免疫性溶血、支原体肺炎、病毒感染、风湿病、系统性红斑狼疮和恶性淋巴瘤等都会使患者体内冷凝集素含量和效价增高，能与红细胞凝集并溶血，甚至引起病人死亡[3]。冷凝集随着温度和效价的不同对血型和配血的影响也不同。在北方环境温度较低的实验室，低效价的冷凝集对血型鉴定和配血影响都可以产生较大的影响。此时可通过提高试验温度或加温来消除冷凝集的影响。当冷凝集效价高于 1∶512时，可用37℃ 0.9%氯化钠注射液多次洗涤才可清除冷凝集的干扰。当冷凝集效价高于1∶1024时，经37℃ 0.9%氯化钠注射液多次洗涤后，试验结果仍有弱凝集，则需对患者的红细胞在45 ℃进行热放散–聚蔗糖分离，然后采用微柱凝胶卡进行ABO血型鉴定和交叉配血试验，才能消除冷凝集素的干扰。当患者红细胞冷凝集素清除试验最后仍有弱凝集，应补充患者抗人球蛋白及分型试验，应考虑患者可能是单纯性高效价冷凝集或免疫球蛋白G（immunoglobulin G，IgG）和C3混合型抗体。若IgG或C3检测一项阳性，则患者有溶血倾向;当IgG和C3同时阳性，则患者溶血严重。应及时寻找病因，告知临床医生输血风险并监测抗体变化。有条件的实验室可进一步分离鉴定IgG抗体，选择合适的血液，减少输血反应。在冬季或室内温度下降等条件下，在临床血型鉴定及配血过程中应注意保温，提高环境温度，避免冷凝集的发生。如仍发生冷凝集现象，可用上述试验等方法解决，报告时要注明有冷凝集现象，同时提示临床保温输血，并且输血要慢，密切观察患者反应，确保输血安全。
综上所述，确定有冷凝集素影响之后，输血科要和临床做好沟通，确保患者在输血过程中有专人陪护，同时注意患者的保暖，不要让患者受凉，并将输注的悬液进行37℃的预温处理，进行缓慢滴注，确保临床输血安全。经过上述一系列措施之后，患者的病情得到了有效的控制，不仅挽救了患者的生命，也有效避免了医患纠纷的发生。
参考文献
冯 旭. 冷凝集患者的血型鉴定及输血策略[J]. 齐齐哈尔医学院学报，2019，40（4）：463-465.
褚笑眉，张海燕，刘久波. 冷凝集素对交叉配血的影响及处理分析[J]. 临床血液学杂志，2016，29（2）：135-136.
李雪，陈信. 冷凝集素对输血安全的影响[J]. 深圳中西医结合杂志，2019，29（5）：84-85.
