王永智 叶华跃 聂利芳 李磊 彭福中
【摘要】药物的口感，是对药物制剂进行研究与评定的重要指标，在保证客观、高效、准确的同时，可以更好的提高药品的商业价值。本文从生物检测的方法入手，在对感官与化学评价方法进行分析的同时，通过五种生物检测方法的探析，详细描述了各种技术手段的具体执行内容，供研究与应用参阅。
【关键词】生物检测;制药;口感评价
市场环境要求口服制剂的口感质量，尤其在重要制剂的检验与分析中，必须对相关刺激性口味进行检验，并通过特定的方式进行控制。在当前的技术条件下，对药物制剂口感的评定，主要集中在感官、化学、生物这三种方法中。在对生物检测进行细致分析之前，应先简单的了解感官与化学评价方法的内容，以此更好的理解生物检测的具体执行方法。
1 感官与化学评价
首先，在对药物进行感官评价的过程中，主要是组织志愿者对不同浓度的药物溶液进行品尝，并在作出口感评价的基础上，汇总所有数据信息，完成药物口感评定。这种方法相对较为传统，在多年的行业发展中，表现出了直观性的优势。但是由于每个志愿者个体的口感存在差异，且难以用精确的数值进行固定，因此也明显受到主观性的影响。而在一些特殊的制剂中，由于存在刺激性物质，甚至在药物中带有毒素，所以这种方法也涉及到一定程度的医学伦理问题。
其次，在化学评价中，主要是通过化学检测的方式，对制剂中的化学成分进行确定，分析游离浓度状态中完成检测，是较为常见的检测方法。但在该方法中，忽视了人为感官的差异性条件，无法对口腔生理环境进行模拟，造成了技术上的不足。科技发展中，虽已经研制出了模拟人类口腔感官的系统，并在温室条件下，通过电子舌的数据采集，完成了较为客观的分析。但其精度条件仍需进一步优化，并逐渐在技术条件的引导下，减少对环境的依赖程度，提高检验效率。注意，即便是在电子舌系统中，也无法完整的控制人体口腔对于味觉的综合分析效果，很难与实际需求内容达到完美的切合[1]。
2 生物检测方法分析
2.1 短暂摄取与双瓶喜好
生态物种中，啮齿类动物的空腔系统与人类较为相似，在生物检测中，可以将其作为试验对象，进行药物口感检测。尤其是在带有刺激或是毒素的药品试验中，这种代替检测可以有效的避免医学伦理问题，并起到检验试验的效果。为使检测效果更加直观，工作人员还可以使用动物行为试验、电生理检测、味觉外周味蕾对比、基因敲除等技术内容，对短暂摄取检测进行优化与调整。
当前技术环境中，双瓶喜好试验的方法，是最为常见的应用技术条件。在试验中，可以利用大鼠群体的群体社交功能，在保证实验准确性的基础上，对用于试验的白鼠进行单独饲养，在不进食的条件下，对差异化的样品溶液进行分别投递。在经过一段时间的记录观察后，分析两类溶剂的消耗水平，以此评价试验对象对于溶剂的喜好程度，推导出具体的口感度水平。这种直观的方法下，可以在量化管理上进行明确的划分，并将口感度设置为具体指标，将低于0.5偏好度的药剂设置为厌恶状态，把大于0.5偏好度的药剂投入后续试验中，以此找到最优化的药剂口感优化策略。
对比这两种检测方法，虽然双瓶喜好的检测效果更为直观，其检验周期相对较长，不能高效化的进行制剂管理[2]。所以，必須以实际进度需求条件为基础，对不同的方法内容进行选择，以保证检验处理符合制剂的应用效果。另外，在对制剂口感进行双瓶喜好检验的过程中，还需对实验动物的年龄与性别进行控制，从而减少其对于偏好条件的影响内容。
2.2 微电极阵列
微电极阵列（EMA）的检测方法，简称为MEA，是通过非侵入性的长期检测，利用对高时间与空间参数的对接，分析味觉细胞的电生理条件，从细胞的维度检验制剂口感效果的方法。在多年的科技发展中，这种技术已经应用在药理、毒理、生物等多项科学研究中。但是，这种方式的重复率较低，在多次重复的处理中，会影响信号的记录内容，由于易耗损特性的影响，使得试验的成本条件大大增加。
实验中，应将舌头进行初步的系列处理，将舌根部的上皮味觉组织剥离，并固定在MEA表面，对其在梨酸盐缓冲液中的兴奋性进行检测，并做出详细的实验记录。然后，将待检测的样本，置于MEA槽室中，在室温条件下，观察所产生的生理信号，对振幅与持续时间进行记录，并计算这两个参数的比值，以此控制实验结构的准确性。由于生物传感器对于具有浓度差异的药物表现出依赖性，所以在实验中，可以在MEA实验中，采用不同药物或是统一药物的不同浓度进行评价。
2.3 果蝇钙成像
果蝇钙成像模型中，可以保证检测中的灵敏性、精确度，并在高通量特征的影响下，提高检测水平。在当前的钙成像方法中，通常是将细胞进行转染操作后，使用荧光相位经对蛋白表达效果进行观察，然后在钙指示剂的作用下，完成细胞的孵育转染。将激光共聚级显微镜作为观察设备，对实验对象加入苦味物质，观察其Ca2+ 的浓度变化参数。
把果蝇作为实验样本受体，检测苦与甜在其神经元系统中的表达内容。由于神经元提供的毛发状结构分布于果蝇的不同位置，在包括咽、翼边、产卵器、腿远端等多种结构中，都有神经元系统。所以，在进行实验的过程中，要针对钙成像实验，处理果蝇的设计结构，并将其作为定向神经元分析的跗骨进行提取[3]。方法上，先切除果蝇腿股骨与胫骨，然后用待测样品，对提取的实验肢体进行刺激，在显微镜的观察下，将特定波长条件的灯光作为激发条件，采集检测数据，并对反映效果进行分析，完成果蝇钙成像的检测内容。注意，在进行此项操作的过程中，必须保证与动物检测同样的控制条件，在选取果蝇样本时，尽可能的使用成年果蝇进行实验，以便在反映内容上，得到更加精确的数据材料，完成口感分析。
2.4 长鼻扩展反射
长鼻扩展反射（PER）中，通过无脊椎动物的长鼻结构的味道反应功能，完成药物的口感效果评价。执行PER实验，首先应从昆虫的收集展开，然后在经过一定时间的适应性培养后进行固定，使药物的作用相应的长鼻部位，观察其反应后的扩展情况，通过记录长鼻扩展的频率与长度参数，确定不同药物的口感差异。在常见的昆虫样本中果蝇、飞蛾有着较好的适用性与实用经验。
例如，Jiang等研究者，在对不痛果糖浓度进行生物检测的过程中，就使用PER方法，将飞蛾作为样本进行检测。在实验结果上，发现了果糖与口感的正相关内容，证明了PER技术可用于不同浓度的生物口感评价。在研究的发展中，通过对技术条件的开发，发现了湿度对动物行为的影响条件，由此，在PER实验中，也可将果蝇作为实验对象，对氨基酸进行检验与鉴别，丰富技术应用空间。
2.5 血清素表征
味觉细胞，在组织结构上，可以为分为I、Ⅱ、III三种类型。作为神经递质的血清素，可在动作电位与膜电位的去极化作用中产生释放，从而起到味觉信息传递的功能。例如，在苦、甜、鲜这三种味觉的刺激下，会在II型受体细胞中产生ATP，而这种ATP优势诱发III型味觉细胞释放血清素的基础。又如，在酸、咸的味觉刺激下，会使III型味觉细胞释放血清素，应直接进入味蕾细胞之间的间隙中。所以血清素表征的检验方法，可以应用在多种味觉条件的检验上，并不仅局限于酸味的测定中。
檢验方法上，可以通过定性、定量的传感器系统、光寻址点位传感器芯片、标记免疫荧光等方法进行检验。具体的，传感器又可分为生物、离子选择电极与微电极这两种类型。
以生物传感器为例，在进行检验的过程中，保持着自身简便、高效、准确的基本特性。但在实验条件上，必须控制味觉细胞与生物传感器之间的距离，以此才能更好的将血清素传递到生物传感器[4]。又如，在离子选择电极与电极的系统中，具有良好的检测性能，但不能对单个细胞释放出的血清素进行检测，必须保证实验对象的基本数量级，才能达到预期的检测效果。
3 总结
生物检测的方法下，可以有效的减少传统评价方式中存在的具体问题，并在优化制剂口感评价系统的过程中，对药物制剂的质量作出优化。通过对比多种差异化的掩味方式，找出针对不同制剂的最优方案，为优质药物制剂的市场化发展奠定基础的技术条件，并在一定程度上提升药物的商业价值，解决原有“良药苦口”的问题，加快我国医疗事业的发展与进步，推进人类健康事业前进。
参考文献
[1]初晓阳，高春红，葛成等，以患者为中心的个体化制剂新技术研究进展[J].中国新药杂志，2018，27 （04）：409-416.
[2]赵生玉，林俊芝，姜红等，中药制剂掩味评价新方法功能性磁共振成像技术应用的前瞻性分析[J].中草药，2017， 48 （20）： 4139-4144.
[3]田星，潘馨慧，陈文等，多种教学方法在药物制剂新技术与新剂型的应用[J].广州化工，2016，44 （11）：230-231.
[4]吴飞，赵春草，冯怡等，中药口服制剂矫味研究的探讨[J].中国新药杂志，2015， 24 （08）： 893-899.
