韩志双 胡凤
摘 要：本实验采用API 20E鉴定系统和国标生化鉴定方法，分别对2020年四川省市场监督管理局能力验证计划提供的样品中分离得到的沙门氏菌可疑菌落进行鉴定。结果表明，两种方法的检测结果均为沙门氏菌阳性，故可用于对食品中肠杆菌科致病菌的鉴定，且API 20E鉴定系统更优于传统生化鉴定方法。
关键词：API 20E 沙门氏菌 鉴定
沙门氏菌是一种食源性致病菌，且大多数食品在生产过程中易接触到此类污染物，这也是食品被沙门氏菌污染的重要途径。其中，畜禽肉类、蛋类、乳制品等食品最易受到该菌的污染，尤其是生鲜[1]类食品。由于沙门氏菌对人类的健康威胁较大，故世界各国普遍规定食品中不得检出该菌。
我国国标方法GB 4789.4-2016[2]中规定了食品中沙门氏菌的检验方法，如传统的生化鉴定方法，但该方法所需时间较长且工作量较大。目前，由于微生物自动化检测系统与常规鉴定方法相比具有准确、快速地发现和鉴定病原体的特点，因此被越来越多地应用于临床检验、疾病控制等领域[3]。API 20E是梅里埃公司根据酶促反应及代谢产物检测而研制的肠杆菌生化鉴定试剂条，API 20E细菌鉴定系统则为国际公认的标准鉴定系统，也是肠杆菌科和弧菌的标准鉴定系统。
本研究将API 20E鉴定系统运用于食品中沙门氏菌的检验，并同国标中的生化鉴定方法结果相比较。
1 材料与方法
1.1 仪器设备及试剂
1.1.1 国标生化鉴定方法
生化试剂盒、阳性对照乙型副伤寒沙门氏菌，由广东环凯微生物科技有限公司制造提供。
1.1.2 API 20E法
API 20E试剂盒、API LAB软件，法国生物梅里埃公司制造提供。
1.1.3 供试品来源
奶粉样品由四川省食品药品检验检测院提供。
1.2 试验方法
1.2.1 国标生化鉴定方法
样品按GB 4789.4-2016经过选择性琼脂平板增菌，经TSI、赖氨酸脱羧酶初步生化确定为疑似沙门氏菌后，将菌落纯化，配制成菌悬液，具体按厂家提供的试剂盒使用说明书执行。
1.2.2 API 20E法
样品按GB 4789.4-2016经过选择性琼脂平板增菌，经TSI、赖氨酸脱羧酶初步生化确定为疑似沙门氏菌后，将菌落纯化，配制成菌悬液，接种于试剂条，于36℃培养18～24h，观察生化反应结果。然后，根据API LAB软件得到鉴定结果。
2 结果和讨论
2.1 结果
生化鉴定结果见表1，API 20E鉴定结果见表2。
2.2讨论
综上所述，API 20E鉴定系统和国标生化鉴定方法均适用于沙门氏菌的鉴定。API 20E是腸杆菌科与其它G一杆菌和弧菌的标准鉴定系统，即可以用一种鉴定试剂条来鉴定大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌及副溶血性弧菌等不同的致病菌。针对国标方法，本实验采用的生化试剂盒只能鉴别一种致病菌，从微生物检测实验室耗材配备角度来看，API 20E可以降低试验成本，优化检测程序。
API 20E生化反应达21种，能有效保证该方法鉴定结果的准确性，不仅集约化了生化试验，也使后续的血清学反应操作更为简便。并且，API 20E仅需试剂条及API LAB软件，不需要配置其他生化试剂，能满足基层实验室的相关需求。
参考文献：
[1] 韩晗，韦晓婷，等.沙门氏菌对食品的污染及其导致的食源性疾病[J].江苏农业科学.2016，44（5）：15-20.
[2] 《中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验-沙门氏菌检验》（GB/T 4789.4-2016）.
[3] 庄华君，金映川，杨旭.API20E、VITEK-32在临床细菌鉴定中的应用[J].中国卫生工程学.2011.8（14）：320-322.
