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高效液相色谱-质谱法测定畜肉中的卡拉胶方法分析

高效液相色谱-质谱法测定畜肉中的卡拉胶方法分析

红藻的细胞壁多糖就是卡拉胶,卡拉胶是半乳聚糖硫酸酯,主要是由半乳糖和半乳糖衍生物组成。根据硫酸基位置和重复结构特征可以细化为11种不同构型,其中最常见的构型为-型。在食品中,卡拉胶主要以混合物为主,由各种构型卡拉胶混合而成。

随着人们生活水平的提高,对食品安全问题更加重视,生鲜市场上出现“注水肉”问题成为当下食品安全聚焦点之一。在“注水肉”问题中,不法分子将目标转移到卡拉胶上,利用卡拉胶提升“注水肉”的效果,成为“注胶肉”,导致正常方法难以识别。而“注胶肉”中含有各种工业色素、防腐剂等物质,很容易导致肉品出现重金属超标、外来物质污染和致病微生物,严重影响到人们的生命安全。

1. 材料与方法

1.1 材料与试剂

畜肉样品分别从超市购买和屠宰场购买,屠宰场畜肉样品全程跟踪,确保为新鲜无添加。卡拉胶:级别选用食品级,生产厂家为深圳乐芙生物科技有限公司。盐酸同样适用食品级,生产厂家为济南源飞伟业化工有限公司,甲酸铵适用化学纯、分析纯,生产厂家为廊坊鹏彩精细化工有限公司。水均为一级实验用水。

1.2 仪器与设备

本次实验所用到的仪器、设备有:高速均浆机、恒温水浴、纯水仪、电子天平、涡旋混匀器、液相色谱-飞行时间质谱仪、液相色谱-三重四极杆质谱仪。

1.3 方法

使用卡拉胶先配制浓度为10mg/ mL的储备液,然后对畜肉样品进行处理,取10g样品,加入23mL水,使用高速均浆机均浆1分钟,并加入盐酸2mL,使用涡旋混匀器旋转30s,并倒入恒温水浴中,温度为80摄氏度,每10分钟振摇一次。最后进行冷藏离心,使用乙腈1:1稀释过滤。接着制作标准工作液,分别制作卡拉胶含量不同的样品,制作方法如上所示,最终使用高效液香色谱-质谱检测检测。

液相色谱条件:进样量5uL;柱温30℃;流速300uL/min;色谱柱50mm×2.1mm,1.8um。

串联三重四极杆质谱条件:检测方式:雾化气压力30psi,鞘气流量8L/min,鞘气温度280℃,干燥气温度200℃,流量5L/min。扫描:毛细管电压4000V,方式为多反应监测。离子源为电喷雾离子源。

高分辨质谱条件:检测方式:一级质谱扫描。扫描:毛细管电压4000V,碎裂电压为135V,雾化气压力40psi,流量10L/min,干燥气温度 325℃,方式为负离子模式扫描。离子源为电喷雾离子源。

2. 结果与分析

2.1 确认标志物离子的方法

通常情况下,卡拉胶的降解方式有三种,分别为物理方法、酸法和酶法。由于降解方式不同,最后得到的结果是,在选择降解方法必须要根据实际情况选择。由于物理方法和酶法降解程度有限,所以本次实验使用酸法降解。

2.2 实际样品分析结果

在畜肉卡拉胶检测中,使用高效液相色谱-质谱法分别检测不同的样品,样品结果显示正常畜肉均为阳性结果,而标有卡拉胶的畜肉,检测结果显示阴性,卡拉胶含量为0.075至0.028g/kg。另外,为了确认高效液相色谱-质谱法检测结果的准确性,针对标示具有0.075g/kg卡拉胶的熟肉,实际检测结果与标示含量相差较小,几乎不存在差异。

3. 结论

总之,在畜肉检测卡拉胶中使用高效液相色谱-质谱法检测,具有高精度的检测结果,即使畜肉掺入卡拉胶也能準确测量出卡拉胶的含量。所以高校液相色谱-质谱法检测满足食品安全的检测,可有效提高食品安全。

作者简介:

高莹(1988-),女,河北邢台人,大专,河北安普检测技术服务有限公司,研究方向:液相质谱。

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