谢丹萍 张金珍 卢永芳
[摘要] 目的 观察非哺乳期乳腺炎（NLM）患者外周血免疫球蛋白、自身抗体和补体水平的变化并分析临床价值。方法 将2016年2月～2017年2月我院76例NLM患者纳入研究組，将同期确诊的76例健康体检者纳入对照组。比较两组患者外周血免疫球蛋白（lgG、lgM、lgA）、补体（C3、C4）及T淋巴细胞亚群（CD4+、CD8+、CD3+）水平差异，观察自身抗体[抗核抗体（ANA）、抗组蛋白抗体（AHA）]表达情况。 结果 两组外周血lgG水平比较差异无统计学意义（P>0.05）。研究组外周血部分免疫球蛋白（lgM、lgA）、补体（C3、C4）水平及自身抗体（ANA、AHA）阳性率高于对照组（P<0.05），T淋巴细胞亚群（CD4+、CD8+、CD3+）水平则低于对照组（P<0.05）。 结论 NLM患者相对于健康人群外周血免疫球蛋白、补体水平及自身抗体阳性率将显著上升，外周血T淋巴细胞亚群水平则显著降低，监测上述指标对NLM患者疾病诊断治疗有一定提示或评估作用。
[关键词] 非哺乳期乳腺炎；免疫球蛋白；自身抗体；补体；T淋巴细胞亚群
[中图分类号] R655.8 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2018）21-0131-03
[Abstract] Objective To observe the changes of peripheral blood immunoglobulins， autoantibodies and complement levels in patients with non-lactating mastitis（NLM） and analyze the clinical value. Methods From February 2016 to February 2017， 76 NLM patients from our hospital were included in the study group. 76 healthy people who were diagnosed in the same period were included in the control group. The differences of the levels of immunoglobulins （lgG， lgM， lgA）， complements （C3， C4）， and T lymphocyte subsets （CD4+， CD8+， and CD3+） in the peripheral blood were compared between the two groups. The autoantibodies [antinuclear antibody （ANA）， anti-histone antibody （AHA）] expressions were observed. Results There was no statistically significant difference in lgG levels in peripheral blood between the two groups（P>0.05）. The positive rate of immunoglobulins（lgM， lgA）， complements（C3， C4） and autoantibodies （ANA， AHA） in the peripheral blood in the study group was higher than that in the control group（P<0.05）. The levels of T lymphocyte subsets （CD4+， CD8+， and CD3+） were lower than those in the control group（P<0.05）. Conclusion The positive rate of immunoglobulins， complements and autoantibodies in peripheral blood of NLM patients will increase significantly compared with healthy individuals. Peripheral blood T lymphocyte subsets are significantly lower. Monitoring the above indicators can provide some indications or assessments for the diagnosis and treatment of NLM.
[Key words] Non-lactating mastitis （NLM）； Immunoglobulins； Autoantibodies； Complements； T lymphocyte subsets
随着人们健康意识的提高和生活环境的改善，作为女性常见疾病的乳腺炎中哺乳期乳腺炎发病率明显下降，但非哺乳期乳腺炎（NLM）发病率却呈上升趋势[1]。该类疾病起病急缓不一，可数天内表现为红肿热痛、乳房脓肿甚至窦道形成等情况的急性症状，也可仅表现为迁延难愈的无痛性乳房肿块的慢性症状[2]。同时，无明显炎症表现的NLM与乳腺癌常难以进行鉴别诊断，易导致误诊误治，又因目前尚无有效的特异性治疗措施，部分患者常需行乳房切除治疗，对患者身心健康造成了严重影响。该疾病发病机制尚未阐明，相关研究显示其可能与免疫反应有关[3]。对此，本研究观察NLM患者和健康人群间各免疫功能指标水平差异，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
将2016年2月～2017年2月我院76例NLM患者纳入研究组，将同期确诊的76例健康体检者纳入对照组。两组患者均为女性，其中研究组年龄21～44岁，平均（32.81±6.49）岁；病程0.5～24个月，平均（5.21±1.01）个月；发病乳房左侧37例，右侧33例，双侧6例。对照组年龄22～45岁，平均（34.12±7.43）岁。两组间年龄比较差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。
1.2 纳入、排除标准[4]
纳入标准：研究组患者均符合NLM诊断标准[5]且经手术病理确诊；对照组均为我院女性健康体检，无任何乳房疾病；自愿签订知情同意书者。排除标准：合并类风湿性关节炎等免疫性疾病者；临床资料不全者；不能提供病理诊断的NLM患者。
1.3 方法
以普通促凝管采集患者入院第2天清晨空腹静脉血9 mL；取3 mL采用西门子特定蛋白仪BNⅡ检测外周血免疫球蛋白（lgG、lgM、lgA）、补体（C3、C4）及T淋巴细胞亚群（CD4+、CD8+、CD3+）水平；抗核抗体（ANA）检测采用间接免疫荧光法，取3 mL血液，离心分离血清，1∶100稀释并点样，将Hep-2/猴肝包被的基质玻片反扣于样板上，18℃～25℃温育30 min，缓冲液冲洗后加荧光二抗18℃～25℃温育30 min，缓冲液冲洗，甘油封片，荧光显微镜下Hep-2细胞无荧光染色为阴性，有荧光染色并可辨荧光模型则判为阳性，试剂盒来自德国欧蒙医学实验检测股份有限公司；抗组蛋白抗体（AHA）检测采用免疫印迹法，取3 mL血液，离心分离血清，缓冲液1∶101稀释，膜条以缓冲液预处理5 min，吸除孵育槽液体，加入1.5 mL血清样本，18℃～25℃温育30 min，缓冲液清洗3次，每次5 min，加入1.5 mL底物液孵育10 min，蒸馏水清洗3次，每次1 min，取出膜条风干，按标记位置判读结果，与非抗原区比较，相应抗原处呈深色条带判为阳性，无条带出现则判为阴性。以肝素抗凝管采集患者入院第2天清晨空腹静脉血3 mL，采用BD FACSCalibur流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群（CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、CD3+）水平。
1.4 观察指标
比较两组患者外周血免疫球蛋白（lgG、lgM、lgA）、补体（C3、C4）及T淋巴细胞亚群（CD4+、CD8+、CD3+）水平差异，观察自身抗体（ANA、AHA）表达情况。
1.5 统计学方法
采用SPSS 19.0统计学软件处理，计数资料以[n（%）]表示，采用χ2检验；计量资料以均数±标准差（x±s）表示，组间采用独立样本t检验；P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组外周血lgG、lgM、lgA水平比较
两组外周血lgG水平无明显差异（P>0.05）。研究组外周血lgM、lgA水平高于对照组（P<0.05）。见表1。
2.2两组外周血C3、C4水平比较
研究组外周血C3、C4水平高于对照组（P<0.05）。见表2。
2.3 两组外周血CD4+、CD8+、CD3+水平比较
研究组外周血CD4+、CD8+、CD3+水平低于对照组（P<0.05）。见表3。
2.4 两组外周血ANA、AHA表达情况比较
研究组外周血ANA、AHA阳性率高于对照组（P<0.05）。见表4。
3 讨论
NLM常见病理类型主要为浆细胞性乳腺炎（PCM）和肉芽肿性乳腺炎（GM），该疾病临床表现变化多样且无特征性表现，诊断主要依靠病理检查[6]。目前NLM病因尚不明确，缺乏明确的微生物学结果支持，尚无标准规范的治疗方案。临床多采用激素、抗生素以及手术等方式治疗该疾病，取得了一定效果。但由于对NLM认识不足，常出现病情反复、迁延难愈等情况，手术治疗亦对患者身心健康造成严重影响。有研究认为该疾病为一种存在免疫功能紊乱的自身免疫性疾病[7]。
IgG主要在机体组织中发挥促进吞噬细胞吞噬和激活补体系统等作用。IgM作为体液免疫应答中最先产生的主要分布于血液中的抗体，可快速有效地激活补体系统[8]。而IgA主要在上皮表面发挥中和抗体作用[9]。本研究中研究组患者外周血IgA、IgM及补体（C3、C4）水平高于对照组，提示NLM患者补体系统因体内免疫球蛋白（IgA、IgM）水平升高而激活，以介导免疫损伤。赵海军等[10]研究显示，非特异性、特异性免疫反应补体系统均有参与，该系统的活化介导炎症性疾病、自身免疫性疾病等疾病的组织炎症损伤，与本研究基本一致。
CD3+代表T淋巴细胞的总数，分为CD4+和CD8+亚群[11]。CD4+为辅助/诱导细胞（Th/Ti），可辅助效应细胞由T细胞的转变生成过程，诱导B细胞生成抗体，活化巨噬细胞[12]。CD8+为抑制/杀伤细胞（Ts/CTL），可抑制T细胞活化、B细胞产生抗体，并可产生细胞毒作用[13]。CD8+功能降低，机体免疫应答过强，可能导致超敏反应和自身免疫性疾病[14]。CD4+和CD8+协同制约维持免疫应答稳定，在清除异物抗原的同时避免损伤自身组织[15]。ANA可与细胞核起反应，无器官和種属特异性[16-17]。在多种AID中均可检测出AHA阳性，其对AID的诊断意义明确[18]。本研究中研究组患者外周血T淋巴细胞亚群水平低于对照组，ANA、AHA阳性率高于对照组，提示NLM患者免疫功能减退且免疫紊乱，对异物抗原清除功能降低并可能对自身组织造成损伤。胡朝军等[19]研究发现，自身免疫疾病（AID）患者血循环中分布有自身抗体，其针对自身组织器官，造成自身免疫损伤，与本研究基本一致。
综上所述，NLM患者相对于健康人群外周血免疫球蛋白、补体水平及自身抗体阳性率将显著上升，外周血T淋巴细胞亚群水平则显著降低，提示NLM为一种存在免疫功能紊乱的自身免疫性疾病，监测患者上述指标水平对该疾病的诊断、治疗及疗效评估重要意义。
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（收稿日期：2018-05-09）
