如果要使用PCR扩增一段已知的DNA序列,要如何设计引物

把这段基因输入设计软件里,调节引物位置,使变性温度在94度,退火温度=Tm-（5到10度） 延伸温度72度左右,满足这些条件基本就可以了,当然还要根据实际情况多次实验得到最佳引物。如果你要扩增整个的基因,引物必须要在起始密码子之前,或包含起始密码子。最后加上酶切位点就可以了。