琼脂糖凝胶电泳跑的DNA为什么会拖尾

学习 时间:2026-03-29 17:29:41 阅读:3511
琼脂糖凝胶电泳跑的DNA为什么会拖尾

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优秀的冰棍

大方的樱桃

2026-03-29 17:29:41

电泳出现拖尾现象,英文成为smear,就是弥散。其原因,主要从以下两个方面考虑:1、PCR产物自身原因:往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物 过多。对策:①减少Taq酶的量,或调换另一来源的酶。②减少dNTP的浓度。③适当降低Mg2+浓度。④增加模板量,减少引物的用量 ,减少循环次数,提高退火温度。2、电泳体系的问题:(1)电泳缓冲液TAE或者TBE的污染,建议更换缓冲液。(2)上样时样品漂了,建议增加上样缓冲液的用量,以及小心加样。(3)电压太高。(4)适当把你的胶的浓度加大。(根据你的片断大小而定)(5)观察你的marker是否也存在拖尾现象,作为对照。以前有挺多人问过这个问题了 借用下以往问题的最佳答案

最新回答共有2条回答

  • 现代的过客
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    2026-03-29 17:29:41

    电泳出现拖尾现象,英文成为smear,就是弥散。其原因,主要从以下两个方面考虑:1、PCR产物自身原因:往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物 过多。对策:①减少Taq酶的量,或调换另一来源的酶。②减少dNTP的浓度。③适当降低Mg2+浓度。④增加模板量,减少引物的用量 ,减少循环次数,提高退火温度。2、电泳体系的问题:(1)电泳缓冲液TAE或者TBE的污染,建议更换缓冲液。(2)上样时样品漂了,建议增加上样缓冲液的用量,以及小心加样。(3)电压太高。(4)适当把你的胶的浓度加大。(根据你的片断大小而定)(5)观察你的marker是否也存在拖尾现象,作为对照。以前有挺多人问过这个问题了 借用下以往问题的最佳答案

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