求组培用培养花粉的培养基的配方

一种裸子植物花粉的离体培养方法及其专用培养基。该培养基配方为：蔗糖120－150g,硼酸0．1－0．2g,氯化钙0．1－0．3g,用水定容至1000ml。培养方法是将裸子植物花粉在室温下水合20－30分钟后,置于所述培养基中培养16－72小时,花粉萌发,得到花粉管。本发明的培养基为花粉的萌发和生长提供必需的环境条件。用本发明的方法进行裸子植物花粉的离体培养,不仅快速、简单易行,而且培养效果好,可获得大量具有生活力的裸子植物花粉管,具有较大的实际应用价值。下面是植物组培的一般培养基配制：配制培养基的具体操作①根据配方要求,用量筒或移液管从每种母液中分别取出所需的用量,放入同一烧杯中,并用粗天平称取蔗糖、琼脂放在一边备用。②将①中称好的琼脂加蒸馏水300～400毫升,加热并不断搅拌,直至煮沸溶解呈透明状,再停止加热。③将①中所取的各种物质(包括蔗糖),加入煮好的琼脂中,再加水至1000毫升,搅拌均匀,配成培养基。④用1N的氢氧化钠或盐酸,滴入③中的培养基里,每次只滴几滴,滴后搅拌均匀,并用pH试纸测其pH值,直到将培养基的pH值调到5。8。⑤将配好的培养基,用漏斗分装到三角瓶(或试管)中,并用棉塞塞紧瓶口,瓶壁写上号码。瓶中培养基的量约为容量的1/4或1/5。培养基的成分比较复杂,为避免配制时忙乱而将一些成分漏掉,可以准备一份配制培养基的成分单,将培养基的全部成分和用量填写清楚。配制时,按表列内容顺序,按项按量称取,就不会出现差错。成分单的格式与内容见表9－2。3。培养基的灭菌与保存培养基配制完毕后,应立即灭菌。培养基通常应在高压蒸汽灭菌锅内,在汽相120℃条件下,灭菌20分钟。如果没有高压蒸汽灭菌锅,也可采用间歇灭菌法进行灭菌,即将培养基煮沸10分钟,24小时后再煮沸20分钟,如此连续灭菌三次,即可达到完全灭菌的目的。经过灭菌的培养基应置于10℃下保存,特别是含有生长调节物质的培养基,在4～5℃低温下保存要更好些。含吲哚乙酸或赤霉素的培养基,要在配制后的一周内使用完,其它培养基最多也不应超过一个月。在多数情况下,应在消毒后两周内用完。