如果质粒与目的基因结合的重组DNA和不含目的基因的质粒,同时在培养基中表达,怎样区分和筛选出目的基因?

一般有两种方法,一是用目的基因的特异性引物以重组质粒为模板,进行PCR扩增。看能否出现目的基因的扩增产物。还有一种是将纯化的质粒进行酶切,因为目的基因连接到载体质粒上时两边都带有人工添加的酶切位点,只要用这些内切酶进行酶切,然后看能否有目的基因的片段被切下来,则可以判定目的基因有没有插入。另外,在有些载体中（如T载体）目的基因是插入在某些标记基因内部的,这样如果标记基因表达正常则没有插入,如果标记基因不表达,那么则正常插入了。如T载体中的LacZ基因。