想做绿色荧光蛋白基因在毕赤酵母中表达的实验,
想做绿色荧光蛋白基因在毕赤酵母中表达的实验,求实验方案,尽量详细些,最好提议下要用到哪些试剂和试剂盒,大四课程设计的选题，要求在实验室完成，不能用太多试剂盒，跪求成熟的实验方案……
最佳回答
炙热的蜜蜂
2026-04-04 17:49:21
建议将GFP全基因克隆到pPIC9k质粒的XhoI和NotI位点之间,也可以找公司全基因合成,一般公司有pPIC9k质粒,公司会提供给你大肠杆菌的工程菌,然后你中抽质粒,再电转化毕赤酵母,用MD平板筛选后在用G418抗性的YPD平板筛选,然后再对筛到的菌株进行蛋白表达。至于如何操作及需要哪些试剂,请参看毕赤酵母表达手册~网上有中译版的,网址告诉你 http://wenku。baidu。com/view/3d89540ef12d2af90242e67d。html
最新回答共有2条回答
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2026-04-04 17:49:21魁梧的山水
回复建议将GFP全基因克隆到pPIC9k质粒的XhoI和NotI位点之间,也可以找公司全基因合成,一般公司有pPIC9k质粒,公司会提供给你大肠杆菌的工程菌,然后你中抽质粒,再电转化毕赤酵母,用MD平板筛选后在用G418抗性的YPD平板筛选,然后再对筛到的菌株进行蛋白表达。至于如何操作及需要哪些试剂,请参看毕赤酵母表达手册~网上有中译版的,网址告诉你 http://wenku。baidu。com/view/3d89540ef12d2af90242e67d。html
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