0.5mol/LNaHCO3浸提-钼锑抗比色法测定石灰性土壤速效磷的实验中,如果真值实验结果偏离真值,

国家农业标准中,采用碳酸氢钠浸提－钼锑抗比色法（Olsen 法）测定石灰性土壤中（中性及酸性土可参照使用）的有效磷含量（其中操作规程以下简称规程）,其中校准曲线或回归方程较易做出或求出,因此也较容易测定。但是,要提高其测定准确性,减轻劳动量还需要注意以下几点。（1）所用的试剂要按规程要求准确配制。一是选用质量合格的仪器、药品、试剂、纯水,要求测定者首先对要使用的仪器进行校准,在试剂的配制中注意观察药品、试剂、纯水的颜色,发现异常要查找原因；二是精确称取或量取；三是按规程要求的步骤顺序配制,调节酸碱度。但需要说明的是：①该规程要求的钼锑抗显色剂,称取的抗坏血酸（C6H8O6左旋,旋光度+21°－22°）0。5g 溶于100mL 钼锑贮备液中测定的结果,土壤有效磷含量要低于称取1。5g 抗坏血酸溶于100mL 钼锑贮备液中测定的结果。②配制磷标准贮备液的KH2PO4要选用优级纯的,而且要经过105℃烘干2h,并冷却后再称取配制。（2）所需试剂要按规程要求保存与使用。钼锑贮备液要盛放于棕色瓶中,避光存放；钼锑抗显色剂要现用现配。（3）所用的器械要反复冲洗干净,有的还要干燥。测定中所用的（刻度、胖肚）吸管、塑料瓶、瓶盖、漏斗、三角瓶、容量瓶、瓶塞、比色皿要反复冲洗干净,塑料瓶、瓶盖、漏斗、三角瓶需烘干后再用。（4）要严格土液比、温度、振荡频率及振荡时间。由于这4 个方面对浸提出的磷含量有至关重要影响,因此一定要严格控制。①要严格土液比。即风干土样准确称取2。50g（电子天平先预热30min,再校准后使用）,加入的碳酸氢钠浸提剂准确量取50。00mL。②要严格浸提温度。可把浸提剂先放在恒温（25±1）℃的环境中,调温至（25±1）℃,再加入到称取的测土样塑料瓶中；振荡要使用恒温水浴振荡机,先使水温调至（25±1）℃,并保持该水温振荡。③严格振荡频率及时间。使用恒温水浴振荡机振荡,振荡频率应调为（180±20）rpm,振荡时间为（30±1）min 后,立即过滤。（5）盛有风干土样的塑料瓶,在加入浸提剂后,要盖紧瓶盖,摇匀后再振荡。（6）过滤要使用无磷定量滤纸,若发现滤液混浊,要重新过滤。（7）在吸取（量取）、称取所需试剂、溶液、药品时,不仅质量（体积）要准,而且不能污染和相互污染。（8）在吸取5。00mL 钼锑抗显色剂加入盛有系列溶液或浸提液的容量瓶中时,要缓慢加入,并慢慢摇动,排出CO2气体,再用纯水定容摇匀。要避免试液溢出。（9）定容摇匀后的待测系列溶液或试样溶液,显色温度要保持在20℃以上,若室内温度过低,可放置于30～40℃的恒温箱中保温30min（温度要一致）,使其充分显色,取出冷却后再比色测定。（10）测定吸光度的1cm 光径比色皿,可用稀盐酸浸泡一夜,再依次用自来水、纯水冲洗干净,泡于纯水中待用,若长期不用应放置于干燥盒内。（11）测定吸光度的比色皿,在出厂时应经过配对。未配对的,测定人员可将其刷洗干净后,自行配对,从中选用经调零后吸光度相差±0。001A 的比色皿,最好选择吸光度一致的比色皿。使用时要使光滑面对准光路,操作人员操作时要手持毛面,擦拭干净外面的液体后,再放入比色槽内。（12）测定前应确保紫外－可见分光光度计能够正常使用。①要配备合适的稳压器,并接地线,使电压稳定,周围无扰动干扰。②光路要对正。可先在比色槽内不放比色皿,检查其吸光度是否一致,不一致的要进行调整。③要先遇热30min,再测定吸光度。（13）测定时刷洗干净的比色皿,要先用待测试液冲刷几遍,再倒入待测试液测定吸光度（若此时仍有小的CO2气泡,要用手指轻弹出后再测定）；测定后倒出试液,用纯水冲刷几遍,再倒入下一个待测试液（要先用该试液冲刷后）进行测定。（14）据资料介绍,可采用紫外－可见分光光度计,在波长880nm 处比色,测定吸光度,而不必使用活性炭进行脱色,以减少劳动量。但在实际测定中,若不加入1g 无磷活性炭,在波长700nm 处比色,测定结果偏低。（15）如果土壤有效磷含量较高,可吸取5。00mL 浸提溶液,另外再吸取5。00mL 碳酸氢钠浸提剂,以保持显色时溶液的酸度。计算结果按所取浸提液的分取倍数计算。（16）每批样品进行测定,要做空白试验、平行试验,并带一个参比样（参比样可自制）。以检测测定结果的准确性,不准确的要查找原因,重做。（17）要做好土样称取、过滤、吸取转移、测定结果的纪录,并且每一项操作都要认真核对,避免人为出错。