菌液直接PCR我的pcr体系是50微升的,预变性时间5分钟,模板7微升,我接种单菌落到增菌液,以往都是煮沸了制模板然后p

学习时间:2026-10-13 02:32:33 阅读：4390

菌液直接PCR我的pcr体系是50微升的,预变性时间5分钟,模板7微升,我接种单菌落到增菌液,以往都是煮沸了制模板然后pcr鉴定是不是我要的细菌,听说可以用菌液直接pcr,不知道预变性时间该改为多少,菌液体积应加多少,其他还要做什么修改,做出来和煮模板做区别大吗?

友好的蚂蚁

2026-10-13 02:32:33

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其实你原体系中7微升都太多了。我做50微升体系最多加3微升模板。菌液PCR只需要用枪头沾取菌落,或者加入2微升左右菌液即可。预变性时间可稍微延长。如果引物特异性好的话,和用DNA模板效果差不多。