我最近在做microRNA的茎环RT-PCR,然后用PAGE电泳时,总是有很多非特异性的条带.请问大家在做这方面的时候也

学习 时间:2026-04-07 22:14:02 阅读:4329
我最近在做microRNA的茎环RT-PCR,然后用PAGE电泳时,总是有很多非特异性的条带.请问大家在做这方面的时候也遇到了吗?该怎么办呢?

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鲤鱼百合

健康的中心

2026-04-07 22:14:02

miRNA由于太短,引物序列可优化范围很小,rt-pcr很容易有非特异性,很多引物都采用LNA来提高退火温度增加特异性。经环方法由于增加了一步特异性反转录理论上更提高了特异性,但结果可能仍不够理想。建议进一步提高退火温度试试,若不行只能继续优化引物甚至用LNA。若是公司设计的就打技术支持的电话吧 再问: 非常感谢,我是采用的文献提供的引物都这样。

最新回答共有2条回答

  • 踏实的羽毛
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    2026-04-07 22:14:02

    miRNA由于太短,引物序列可优化范围很小,rt-pcr很容易有非特异性,很多引物都采用LNA来提高退火温度增加特异性。经环方法由于增加了一步特异性反转录理论上更提高了特异性,但结果可能仍不够理想。建议进一步提高退火温度试试,若不行只能继续优化引物甚至用LNA。若是公司设计的就打技术支持的电话吧 再问: 非常感谢,我是采用的文献提供的引物都这样。

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