请问酶切时分别单酶切可以切动,而双酶切结果和单酶切相同,是怎么回事啊?谢谢啦!

切割肯定是都可以的。只不过是用双酶切的话,链接的时候就跟准确。因为在目的基因和运载体上分别都有两个不同粘性末端的切口,假设为切口1和切口2那么基因在和运载体链接的时候,只能基因上的切口1和运载体上的切口1链接,基因上的切口2和运载体上的切口2链接,这样就保证了基因的顺序。如果只用一种,都是切口1,那么基因链接时候的顺序是有两种的。 再问： 您好，谢谢您的解答！是这样的，我是想要进行双酶切以便于保证连接的顺序的正确性，但是双酶切结果与单酶切相同，两种酶分别单酶切都是可以切动的，但双酶切是总是感觉只有一种酶起作用。所以我想请教一下您这可能是什么原因？麻烦您啦！ 再答： 1 2 1 ———————————————— 1 1 比如，上面是一条基因，用1酶切，得到 ———————————— 用1 ，2切割 ，得到 ————————— 1 2 那么在链接的时候，有1,2两种末端的就不会颠倒顺序啊。 的确是两种酶都起作用了啊再问： 谢谢您的及时答复，可能是我没有表述清楚。我想要切的是一个质粒，并且我用的那两种酶在这个质粒上分别只有一个酶切位点。但双酶切结果与两种酶分别单酶切相同，即分别单酶切都可以切动，但双酶切却只有一个酶可以切动。辛苦啦！ 再答： 这个啊，，应该是切割序列的问题。 比如酶1，切割序列是 -AG CTTCAG- -TCGAAG TC- 空出来的位置是切点。 酶2的切点是 -AGC TTCAG- -TCGAA GTC- 看，他们都是在很相邻的位置存在切割位点 那么，假如酶1 切割了，就会破坏酶2 的切割位点，导致酶2失效 一样的，假如酶12切割了，就会破坏酶1的切割位点，导致酶1失效