植物材料和动物材料在制备染色体标本过程中的区别

植物1 材料与方法1。1 供试材料 试验用植株由校园内采集。1。2 根尖制片1。2。1 常规压片 通常是在早上9-10点采集葱兰的根然后在室温下放入0。1％秋水仙素溶液中进行预处理处理8 h。然后就在常温把材料放在卡诺氏固定液下固定10m,接下来就在1 mol／L盐酸溶液中解离到松软刚合适为止。最后是用蒸馏水将葱兰根冲洗干净,这样前处理就结束。处理完后就可以用醋酸洋红染色或改良苯酚品红染色[4]。压片/涂片后选取典型的染色体,在40倍物镜及油镜下显微照相。1。2。2 去壁低渗法 去壁低渗法也是把材料放0。1％秋水仙素溶液中进行预处理处理8 h。然后前低渗即是将根尖放在0。075 tool／L KCI低渗液中,在20～25℃条件下处理0。5h。接下来就是最关键的去壁,倒去KCI溶液,加入2。5％混合酶液,在25～30℃温度下处理2～5 h左右。去壁后要进行后低渗,使细胞完全胀,即是用20～30℃蒸馏水慢慢冲洗2～3次后,再将根尖放在0。075 tool／L KCI低渗液中处理。动物1)动物的选择,一般用小鼠,其繁殖能力强,易于饲养。我们常用的是它们的骨髓细胞和精巢,因其分裂指数较高,不用体外培养就可以得到分裂中期的细胞。2)秋水仙素用量要注意,太多或处理时间过长,会导致染色体的过分凝缩或着丝点裂解,最终会引起染色体形态不正常,甚至被破坏或溶解。3) 低渗处理很关键。低渗液的量、处理时间均与细胞的数量有关。低渗过度,细胞会破裂；低渗不足则染色体在一起,分散不开。4) 离心速度或离心时间也能影响染色体标本的制备。离心速度过大或离心时间过长,则会引起细胞破裂；反之,离心速度过小或离心时间过短,则细胞沉降不下来,则会引起大量细胞的丢失。5) 固定液要随用随配,固定彻底后再打散细胞团块,否则细胞容易破碎,染色体分散亦受到影响。6) 载玻片要预冷。冷却不够,则会影响染色体的附着和铺展。7) 用吸管吹散细胞时用力必须尽量轻柔,用力过大则会造成细胞破裂,而染色体也会弥散在溶液中,在随后的离心中将会丢失。8) 滴片时的高度很重要,高度过低细胞不会破裂；过高则染色体过于分散甚至丢失,无法辨别出染色体的准确数量。