PCR技术在食品微生物检测中的应用

PCR 技术检测微生物的基本原理是在被检测微生物核酸序列,在PCR 体系下经高温变性、低温退火、适温延伸三步循环将单个核酸分子序列以2的指数进行大量复制扩增的过程。即在检测时,被检测微生物双链DNA 序列在94℃变性解链成双链,55℃特异性引物与单链DNA 结合,72℃在引物的引导延伸复制检测微生物DNA 序列。以上三步进行循环扩增得到大量的被检测微生物DNA 序列,最后一般在凝胶电泳下检测目的DNA。理论上只要样品中有一个分子的微生物就可以在短时间内用PCR 技术检测到。食品中污染微生物种类很多,即使是同一种食品中微生物种类也有很多,用传统的方法检测食品中微生物要分离出所有的微生物很困难。特别是在检测食品中的弱势菌时,可能很难用传统的方法检测出来,特别是有些微生物很难培养,而用PCR 技术检测这些微生物可以避免这些问题,因此,利用PCR 技术能够比较准确地检测食品中微生物。