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存在于含有共轭双键的酪氨酸和色氨酸,具有吸收紫外线,在280nm波长的吸收峰,并且在此波长的吸收峰的光密度OD280nm其浓度值成比例关系的性质的蛋白质,它可以被用作定量测定蛋白质的基础。
该方法简便,快速,不消耗样品(回收),用于纯化的蛋白微量。缺点:大的差异的分析标准蛋白酪氨酸和色氨酸含量 - 固定误差(精确的定量纯粹的产品必须具备所需的蛋白质为标准进行比较,已经知道了消光系数作为参考),2。许多杂质在280nm的波长 - 吸收能力,可能会出现干扰。特别是在核酸(嘌呤和嘧啶碱基),更严重的影响。然而,核酸,在260nm处有最大吸收峰,因此,溶液,同时存在的核酸(嘌呤,嘧啶等吸收紫外线)时,必须同时测定OD260nm和OD280nm。两个OD值?测量在280nm和260nm处,必须与核酸混合,然后根据两个波长,由经验式校正的吸收程度的比率,为了消除的效果的核酸和推导的蛋白质的实际内容,然后式推算蛋白质含量。
最新回答共有2条回答
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2026-04-07 01:23:29狂野的楼房
回复存在于含有共轭双键的酪氨酸和色氨酸,具有吸收紫外线,在280nm波长的吸收峰,并且在此波长的吸收峰的光密度OD280nm其浓度值成比例关系的性质的蛋白质,它可以被用作定量测定蛋白质的基础。 该方法简便,快速,不消耗样品(回收),用于纯化的蛋白微量。缺点:大的差异的分析标准蛋白酪氨酸和色氨酸含量 - 固定误差(精确的定量纯粹的产品必须具备所需的蛋白质为标准进行比较,已经知道了消光系数作为参考),2。许多杂质在280nm的波长 - 吸收能力,可能会出现干扰。特别是在核酸(嘌呤和嘧啶碱基),更严重的影响。然而,核酸,在260nm处有最大吸收峰,因此,溶液,同时存在的核酸(嘌呤,嘧啶等吸收紫外线)时,必须同时测定OD260nm和OD280nm。两个OD值?测量在280nm和260nm处,必须与核酸混合,然后根据两个波长,由经验式校正的吸收程度的比率,为了消除的效果的核酸和推导的蛋白质的实际内容,然后式推算蛋白质含量。
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