做连接的时候如何确定载体与目的基因的量，我虽然知道摩尔质量比为3:1，但是如何具体计算，请详细说明

我用的载体是pUC18-T，目的基因为1000bp，目的基因上样量为10ul，亮度与DL2000的1000bp的条带相当，应该为50ng。