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跳跃的大碗
2026-06-04 13:52:29
首先引物要跟模板紧密结合,其次引物与引物之间不能有稳定的二聚体或发夹结构存在,再次引物不能在别的非目的位点引起DNA聚合反应(即错配)。
围绕这几条基本原则,设计引物需要考虑诸多因素,如引物长度（primer length）,产物长度（product length）,序列Tm值 (melting temperature),ΔG值(internal stability),引物二聚体及发夹结构（duplex formation and hairpin）,错误引发位点（false priming site）,引物及产物GC含量（composition）,有时还要对引物进行修饰,如增加限制酶切点,引进突变等。
我喜欢Primer5。0,纯属个人喜好,Oligo 6功能也很强大!
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最新回答共有2条回答
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2026-06-04 13:52:29热情的流沙
回复首先引物要跟模板紧密结合,其次引物与引物之间不能有稳定的二聚体或发夹结构存在,再次引物不能在别的非目的位点引起DNA聚合反应(即错配)。围绕这几条基本原则,设计引物需要考虑诸多因素,如引物长度（primer length）,产物长度（product length）,序列Tm值 (melting temperature),ΔG值(internal stability),引物二聚体及发夹结构（duplex formation and hairpin）,错误引发位点（false priming site）,引物及产物GC含量（composition）,有时还要对引物进行修饰,如增加限制酶切点,引进突变等。我喜欢Primer5。0,纯属个人喜好,Oligo 6功能也很强大!
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