题文
通过动物细胞培养的方法可以研究某种化学物质是否能够使染色体畸变，请你完成下列实验并回答有关问题。实验原理：有毒物质能诱导染色体畸变，根据发生染色体畸变细胞的数量(或其占全部培养细胞的百分数)，可判断该化学物质的致畸性的强弱。
材料、药品、用具：
活的小白鼠胚胎、某种化学物质、某种酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、生理盐水、灭菌设备、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、培养瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜等。
实验步骤：
(1)制备细胞悬浮液把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎，转入锥形瓶中，加入________酶液(写出酶的具体名称)处理，使胚胎组织离散成单个细胞，再加入动物细胞培养液，制成细胞悬浮液。
(2)进行细胞培养
①．取A、B二个洁净的培养瓶，________。
②．向A培养瓶中加入适量的该化学物质并将培养瓶摇匀；向B瓶中加入________。在动物细胞培养过程中，由于动物细胞在培养瓶中贴壁生长具有________现象，所以细胞停止分裂增殖时，培养瓶壁上形成的细胞层数是________。
(3)制作临时装片
①．细胞增殖到大约第8代左右时，同时从恒温箱中取出二个培养瓶，再次将瓶内动物细胞处理成细胞悬浮液，加入动物细胞固定液以便迅速杀死并固定细胞。
②．静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液，滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央，_____________，3~5min后，盖上盖玻片。
(4) 镜检和统计把临时装片放在显微镜下，先用低倍镜后用高倍镜，寻找处于________期的细胞。并与B组观察结果作对比。
预期结果及相应的结论
(与B组相比较)
如果________，则说明这种化学物质致畸性很强；
如果________，则说明这种化学物质致畸性较弱；
如果________，则说明这种化学物质没有致畸性。
题型：未知 难度：其他题型
答案
(1)胰蛋白
(2)①．(消毒灭菌)加入等量的细胞悬浮液 ②．等量生理盐水接触抑制单层（或一层）
(3)②．用适宜浓度龙胆紫溶液染色
(4)细胞有丝分裂中
染色体畸变的细胞数量(或占全部培养细胞的百分数) 很多
染色体畸变的细胞数量(或占全部培养细胞的百分数) 较少
染色体畸变的细胞数量(或占全部培养细胞的百分数) 几乎没有
解析
该题暂无解析
考点
据考高分专家说，试题“通过动物细胞培养的方法可以研.....”主要考查你对 [动物细胞的培养 ]考点的理解。
动物细胞的培养
动物细胞培养：
1、动物细胞的培养：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。
2、动物细胞培养液的成分：葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。
3、动物细胞培养液的特点：液体培养基含动物血清。
4、动物细胞培养需要满足以下条件
(1)充足的营养供给——微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等。
(2)适宜的温度：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。
(3)无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。
(4)气体环境：95%空气+5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。
5、动物细胞培养的过程：
取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。
植物组织培养和动物细胞培养：
项目植物组织培养动物细胞培养理论基础植物细胞的全能性细胞增殖培养基类型（半）固体培养基液体培养基成分水、矿质元素、维生素、蔗糖、氨基酸、琼脂葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、促生长因子、动物血清等取材植物幼嫩部位或花药等动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织过程
结果新的组织或植株个体，可以体现全能性新的细胞系或细胞株，不形成个体，不体现全能性应用①植株快速繁殖
②脱毒植株的培育
③人工种子
④生产药物、杀虫剂等
⑤转基因植物的培育①蛋白质坐物制品的生产
②皮肤移植材料的培育
③检测有毒物质
④生理、病理、药理学研究相同点①两技术手段培养过程中都进行有丝分裂，都是无性繁殖，都可称克隆，都不涉及减数分裂
②均需无菌操作，需要适宜的温度、pH等条件
知识点拨：
1、细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。
2、动物细胞培养技术的应用：制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质、培养医学研究的各种细胞。
3、细胞株传至50代后，不能再传下去，但有部分存活的细胞一般能够传到40～50代，这种传代细胞叫做细胞株。
4、细胞株细胞的遗传物质没有发生改变。当细胞株传至50代以后又会出现“危机”，不能再传下去。但是有部分细胞的遗传物质发生了改变，而且带有癌变的特点，有可能在培养条件下无限制地传代下去，这种传代细胞成为细胞系。
知识拓展：
1、动物细胞培养技术的应用
(1)生产病毒疫苗、单克隆抗体、干扰素等。
(2)利用动物细胞培养技术中的细胞贴壁生长和接触抑制的特点，可用烧伤病人自己的健康皮肤细胞培养出大量的自身薄层皮肤细胞，以供植皮所需。
(3)培养的动物细胞用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性。
2、用胰蛋白酶处理组织块，可使细胞分散开，这样做的目的是使细胞与组织液充分接触，这也说明了细胞间的主要物质是蛋白质。
3、当动物细胞培养超过50代后，少数细胞发生突变而持续分裂成为癌变细胞。癌细胞失去了接触抑制，可以在培养瓶中形成多层细胞。
4、动物细胞培养基成分特有的动物血清含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等多种成分．
5、植物组织培养最终产生新个体，体现全能性；动物细胞培养产生大量细胞，不形成新个体，故不能体现全能性。
