题文
DNA在NaCl溶液中的溶解度有二重性,随着NaCl溶液浓度的变化而变化。
(1)请在下列不同浓度的NaCl溶液中选出能使DNA溶解度最高的一种是______。
A.0.14mol/L B.2mol/L C.0.15mol/L D.0.3mol/L
(2)DNA不溶于酒精溶液,但细胞中的某些物质却可以溶于酒精溶液,利用这一原理可以________________,可以推测溶于酒精中的物质可能有________________。
(3)利用DNA遇________呈蓝色的特性,将该物质作为鉴定________的试剂。其实验过程要点是向放有____________的试管中加入4mL的__________。混合均匀后,将试管置于________5min,待试管________,观察试管中溶液颜色的变化,这个实验也说明DNA耐________温。
(4)PCR一般要经历三十多次循环,每次循环可分为________、________、________三个步骤。DNA的羟基(-OH)末端称为________。PCR技术与细胞内DNA复制在解旋时原理不同:细胞内复制利用________使双链间氢键断裂,而PCR技术利用________原理,使双链氢键断裂,DNA的合成方向总是从子链的________端向________端延伸。
(5)一个由32P标记的DNA分子,放在未标记的环境中培养,复制5次后,标记的DNA分子占DNA分子总数的________。假定DNA片段含200对脱氧核苷酸,经3次扩增,从理论上计算需要________个游离脱氧核苷酸,若某样品DNA中共有3000个碱基对,其碱基数量满足:(A+T):(G+C)=1/2,现欲得到1000个拷贝(与样品相同的DNA),至少需要向试管中加入________个腺嘌呤脱氧核苷酸。
(6)DNA扩增过程中,DNA片段经若干次扩增,与其数目的理论值变化相符的图是______。
题型:未知 难度:其他题型
答案
(1)B
(2)除去杂质;某些脂质、蛋白质、糖类或其他大分子物质
(3)二苯胺;DNA;DNA;二苯胺试剂;沸水中水浴加热;冷却后;高
(4)变性;复性;延伸;3′端;解旋酶;热变性;5′端;3′端
(5)1/16;2800;999000
(6)C
解析
该题暂无解析
考点
据考高分专家说,试题“DNA在NaCl溶液中的溶解.....”主要考查你对 [多聚酶链式反应扩增DNA片段 ]考点的理解。
多聚酶链式反应扩增DNA片段
多聚酶链式反应扩增DNA片段:
1、PCR原理:在解旋酶作用下,打开DNA双链,每条DNA单链作为母链,以4中游离脱氧核苷酸为原料,合成子链,在引物作用下,DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链,即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物,其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。
2、PCR反应过程是:变性→复性→延伸
过程说明图解变性当温度上升到90℃以上时,双链DNA解聚为单链复性温度下降到50℃左右,两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合
延伸72℃左右时,TaqDNA聚合酶有最大活性,可使DNA新链由5'端向3'端延伸
3、结果:上述三步反应完成后,一个DNA分子就变成了两个DNA分子,随着重复次数的增多,DNA分子就以2n的形式增加。PCR的反应过程都是在PCR扩增仪中完成的。
细胞被DNA复制与PCR技术的比较:
细胞内DNA复制体外DNA扩增(PCR)不同点解旋在解旋酶作用下边解旋边复制80~100℃高温解旋,双链完全分开酶DNA解旋酶、DNA聚合酶TaqDNA聚合酶引物RNADNA、RNA温度体内温和条件高温相同点①需提供DNA模板
②四种脱氧核苷酸为原料
③子链延伸的方向都是从5'端到3'端
知识点拨:
1、DNA分子复制的人工控制
解开螺旋:在80~100℃时,DNA双螺旋打开,形成两条DNA单链,称为变性。
恢复螺旋:在50~60℃左右时,两条DNA单链重新形成双螺旋结构,称为复性。
复制条件:缓冲液,DNA模板、四种脱氧核苷酸、热稳定DNA聚合酶、两种引物。
控制仪器:PCR仪(温度周期性自动调节仪)。
2、PCR的含义是多聚酶链式反应。
3、PCR技术反应的条件:①稳定的缓冲溶液环境;②DNA模板;③合成引物;④四种脱氧核甘酸;⑤DNA聚合酶;⑥温控设备
4、PCR技术最突出的优点是快速、高效、灵活、易于操作。
5、TaqDNA聚合酶的特点是:耐高温。
知识拓展:
1、DNA含量的测定——分光光度法
项目说明原理DNA在260nm的紫外线波段有一强烈吸收峰,峰值大小与DNA的含量是正相关过程稀释2μLPCR反应液,加入98μL蒸馏水,即将样品进行50倍稀释对照调零以蒸馏水作为空白对照,在波长260nm处,将紫外分光光度计的赌注调节至零测量取DNA稀释液100μL至比色杯中,测定260nm处的光吸收值计算DNA含量(μg/mL)=50×(260nm的读数)×稀释倍数2、DNA聚合酶不恩能够从头合成DNA,只能从DNA的3'端开始延伸DNA链,因此DNA复制需要引物。



