上游引物:pcr 为什么要同时用上下游引物

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作文陶老师原创
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1.pcr 为什么要同时用上下游引物

DNA分子两端不一样,因为核苷酸分子不是对称的,磷酸端和羟基端。DNA复制总是从5’端到3’端,因为DNA聚合酶只能往3’端加核苷酸。所以谁先复制谁上游,是某一个序列/碱基相对于另一个序列/碱基而言。引物的概念我就不说了,然后DNA是双链,两个链是反向平行的,DNA聚合酶顺着其中一个链走,这个链就是负链,另一个链是反着一段一段复制的,这个是正链。

2.什么是上游引物和下游引物?

但我怎么发觉挺难回答的......上游引物就是和要扩增基因片断上游序列结合的引物(引物就是单链寡聚核苷酸,基因扩增需要从引物开始),下游引物指与目的基因片断下游序列结合者。(上下两条长线代表DNA模板)5'----这个是下游引物5'--这个是上游引物3'普通的PCR反应(就是用来扩增基因片断的反应),都是有且只有一个上游引物和一个下游引物的,也就是一对引物。因为DNA有两条链啊,半保留复制方式,细节你可以去看看PCR反应原理或生物体的DNA复制等内容。

3.上游引物用英文怎么说

上游引物:又称为正向引物;下游引物:R-引物,又称为反向引物。

4.什么是上游引物?

先说上游。DNA分子两端不一样,因为核苷酸分子不是对称的,5'位有个磷酸,3'位是-OH 就是:磷酸端和羟基端。DNA复制总是从5’端到3’端,因为DNA聚合酶只能往3’端加核苷酸。所以谁先复制谁上游,往后的就是下游,上游下游是个相对概念,是某一个序列/碱基相对于另一个序列/碱基而言。引物的概念我就不说了,看摆渡百科。然后DNA是双链,两个链是反向平行的,DNA聚合酶顺着其中一个链走,这个链就是负链,另一个链是反着一段一段复制的,这个是正链。所以上游引物就是位于整个扩增子(就是被扩增的目的序列)的5’端的引物。同DNA负链互补,同正链序列相同。 强烈建议找个教科书抱着看.

5.上游引物P 的是3ˊ端的还是5ˊ端的?

是5‘端。因为DNA的复制是从5‘到3’。

6.为什么PCR需要上下游两个引物,各有什么作用啊?

PCR反应第一步DNA双链变性逐步打开,第二部退火时两个引物各自与其互补链的5‘端通过碱基互补结合,用上上下游两个引物目的是为了能够专一的复制出目的基因的特定序列。

7.PCR中正向引物和反向引物的概念和具体作用?

正向引物和反向引物是相对的,通常以一个双链DNA(上面的那条链)的上游结合部位称为正向引物,而下面那条互补链的下游结合部位称为反向引物。PCR的扩增的确是一条引物就可以扩增了。反向引物的存在可以结合互补链,使互补链的扩增方向也是5-3,循环一次就是4条链同时扩增再循环一次就是8条链同时扩增,正向合成时延伸到反向引物结合位点时就会停止,同理反向引物也是。PCR引物设计的目的是为了找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板DNA序列。引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否。为了保证目的片段两端的引物都能与模板配对互搭,所以在设计引物时,尽量使两个引物的Tm值不要差别太大。一般引物长度为15~30碱基,扩增片段长度为100~600碱基对。一般引物序列中G+C含量一般为40%~60%。

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