pbst:TBST是什么？

1.TBST是什么？

是做WESTERN BLOT中常用的一种缓冲溶液。TBS是Tris-HCl缓冲盐溶液,为等渗盐溶液加Tris-HCl缓冲液用1N HC1调pH至7.4,Tween为一种非离子型去污剂,有复性抗原的作用,可提高特异性的识别能力。因为western 中所用的膜可以与蛋白质结合，这样的话孵育过程中，抗体是能够与膜非特异性结合的，为了防止以后曝光造成胶片背景太高，在孵育抗体后，混有Tween 2的PBS 能够将非特异性结合的抗体洗掉，增加特异性。在抗体的保存中，抗体往往是以极高浓度保存在甘油之中的。

2.为什么用PBST洗膜

缓冲液能够维持稳定的PH值，不会破坏掉膜上蛋白质和抗体的稳定性及二者的免疫结合。是一种非离子型去污剂。

3.elisa中为什么用pbst洗涤

既含亲水基团，也含疏水基团，借助其疏水基团与经疏水性相互作用被动吸附于聚苯乙烯固相上蛋白的疏水基团形成疏水键，同时在其亲水基团与液相中水分子的结合作用下，促使蛋白质脱离固相而进入液相。

4.western blot中，封闭液封闭完成后，需要用PBS或PBST洗涤滤膜，然后进行一抗孵育

PBS中加入Twen-20是PBST缓冲液,1× 2×是缓冲液浓度的意思。1×PBST缓冲液可以直接使用。

5.PBST缓冲液:1× 2×是什么意思

PBS中加入Twen-20是PBST缓冲液,为了有更好的洗涤效果，可以说是一种去污剂。1× 2×是缓冲液浓度的意思。1×PBST缓冲液可以直接使用，2×PBST缓冲液需要稀释成1×PBST缓冲液之后使用。也就是说一半的2×PBST缓冲液加另一半的水就是1×PBST缓冲液。

6.在western中是不是所有的TBST都可以用PBST替换

都推荐TBST。

7.为什么加入二抗前要先用pbst洗再用pbs洗

tween 和triton 都是做组化或者western时经常用到的试剂。tween可以增加一抗、二抗的抗原特异性，所以PBST中一般洗抗体时是加入tween。