转膜:western blot 为什么要转膜

1.western blot 为什么要转膜

更便于操作。蛋白胶一方面是比较易碎，不容易操作，另外蛋白在凝胶中容易扩散，不易得到理想锐利的条带。而印迹膜操作方便，有些比较容易做的WB实验。

2.westernblotting转膜是根据什么原理

蛋白质印迹（免疫印迹试验）即Western Blot物、物化免疫遗传用种实验其基本原理通特异性抗体凝胶电泳处理细胞或物组织品进行着色通析着色位置着色深度获特定蛋白质所析细胞或组织表达情况信息蛋白质印迹由瑞士米歇尔弗雷德希物研究所（Friedrich Miescher Institute）Harry Towbin1979提尼尔·伯奈特（Neal Burnette）于1981所著《析物化》（Analytical Biochemistry）首称Western Blot蛋白免疫印迹（Western Blot）电泳离细胞或组织总蛋白质凝胶转移固相支持物NC膜或PVDF膜用特异性抗体检测某特定抗原种蛋白质检测技术现已广泛应用于基蛋白水平表达研究、抗体性检测疾病早期诊断等面

3.western 为什么要在4℃环境下进行转膜

系统会发热，发热以后会造成样品的降解，导致后续实验当中检测失败。有很多过夜的抗体孵育工作，都是在4C条件下进行的，最大限度的保证样品的完整性。

4.western blot转膜不完全怎么办？

Electrophoresis转膜：

5.Western Blot中的转膜在英语上怎么说

电泳：Electrophoresis转膜：trarsmembrane

6.westernblotting转膜是根据什么原理

western blot中封闭主要是起去除非特异性吸附的作用在western blot转膜时，PVDF膜在甲醇活化后是带电的，因而在转膜时会将蛋白吸附。产生非特异条带或者是背景杂乱。

7.Western 转膜时用干转还是湿转效果比较好？

关键看效果怎么细分，速度快，效率稍低，速度比较慢，转移效率高。但是最主要看蛋白的分子量大小。如果普通分子量为主，效率非常高，分子量特别大，又没有其他人的方案做参考，可以先试试湿转。就是几个小时等得比较痛苦。至于说效果，不是丰度特别低的蛋白。

8.做western blot时为什么转膜后膜上没有蛋白?

还是用ponseau S （丽春红）给膜上的蛋白质显色看一下到底如何。另外膜上没有marker的话，胶上还看得到marker吗？那么蛋白质可能也还在胶上，可以改变电流和时间重做一遍。如果胶上膜上都没有，正负极接反。