转膜:做western blot时为什么转膜后膜上没有蛋白?

1.做western blot时为什么转膜后膜上没有蛋白?

只看marker也不可靠吧？还是用ponseau S （丽春红）给膜上的蛋白质显色看一下到底如何。另外膜上没有marker的话，胶上还看得到marker吗？如果还在胶上，那么蛋白质可能也还在胶上，可以改变电流和时间重做一遍。如果胶上膜上都没有，那搞不好就跟二楼说的一样，正负极接反，样品全跑到缓冲液里去了。。。。。。

2.westernblotting转膜是根据什么原理

蛋白质印迹（免疫印迹试验）即Western Blot物、物化免疫遗传用种实验其基本原理通特异性抗体凝胶电泳处理细胞或物组织品进行着色通析着色位置着色深度获特定蛋白质所析细胞或组织表达情况信息蛋白质印迹由瑞士米歇尔弗雷德希物研究所（Friedrich Miescher Institute）Harry Towbin1979提尼尔·伯奈特（Neal Burnette）于1981所著《析物化》（Analytical Biochemistry）首称Western Blot蛋白免疫印迹（Western Blot）电泳离细胞或组织总蛋白质凝胶转移固相支持物NC膜或PVDF膜用特异性抗体检测某特定抗原种蛋白质检测技术现已广泛应用于基蛋白水平表达研究、抗体性检测疾病早期诊断等面

3.western blot转膜不完全怎么办？

个人建议时间不要再长了，再长蛋白有可能变性造成后续实验无法进行。我原来遇到这类问题是用以下几种方法尝试解决的，你也可以尝试一下（1）检查一下你的三明治结构夹的怎么样，尤其是膜及滤纸的边缘是不是有短接的地方，这个是最容易出现的问题。另外膜和胶之间是不是有气泡，不推荐用外力去擀压膜和胶，推荐用缓冲液润湿膜和胶之后，像做切片盖盖玻片一样从一边盖下赶出气体。要绝对确保没有短接和气泡，不然很容易出现转膜不完全的问题。但是有的时候确实能够解决问题。但是注意半干转更要确保没有短接气泡。

4.western 为什么要在4℃环境下进行转膜

还是用ponseau S （丽春红）给膜上的蛋白质显色看一下到底如何。另外膜上没有marker的话，胶上还看得到marker吗？那么蛋白质可能也还在胶上，可以改变电流和时间重做一遍。

5.Western Blot中的转膜在英语上怎么说

Electrophoresis转膜：

6.westernblotting转膜是根据什么原理

western blot中封闭主要是起去除非特异性吸附的作用在western blot转膜时，PVDF膜在甲醇活化后是带电的，因而在转膜时会将蛋白吸附。产生非特异条带或者是背景杂乱。

7.Western 转膜时用干转还是湿转效果比较好？

关键看效果怎么细分，效率稍低，速度比较慢，转移效率高。但是最主要看蛋白的分子量大小。效率非常高，又没有其他人的方案做参考，可以先试试湿转。就是几个小时等得比较痛苦。至于说效果。